Mannitol Salt Agar til isolering af Staphylococcus aureus

Mannitol Salt Agar (MSA) er brugt som en selektiv og differentieret medium til isolering og identifikation af Staphylococcus aureus fra kliniske og non-kliniske prøver. Det tilskynder til vækst af en gruppe af visse bakterier, mens de hæmmer andres vækst. Det er et selektivt medium udarbejdet i henhold til Chapmans anbefalinger til isolering af formodede patogene stafylokokker.,

Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)

Ingredients	Gms / Litre
Pancreatic Digest of Casein	5.0 gm
Peptic Digest of Animal Tissue	5.0 gm
Beef Extract	1.,0 gm
Sodium Chloride	75.0 gm
D-Mannitol	10.0 gm
Phenol Red	0.025 gm
Agar	15.0 gm
Total	111. 025 gm

Distilled Water = 1000 ml

Final pH 7.4 ± 0.,2 ved 25 C. C.

princip om Mannitol Salt Agar

Mannitol Salt Agar indeholder peptoner og oksekødekstrakt, der leverer nitrogen, vitaminer, mineraler og aminosyrer, der er essentielle for vækst. Koncentrationen på 7, 5% af natriumchlorid resulterer i delvis eller fuldstændig hæmning af andre bakterieorganismer end stafylokokker. Natriumchlorid leverer også vigtige elektrolytter til transport og osmotisk balance. Mannitol er det fermenterbare kulhydrat, hvis fermentering fører til syreproduktion, påvist ved phenolrød indikator, aids i differentieringen af stafylokokarter., Coagulase positive stafylokokker (f.Staphylococcus aureus) producerer gule kolonier og et omgivende gult medium, mens coagulase negative stafylokokker producerer røde kolonier og ingen farveændring af phenol rød indikator. Agar er størkningsmidlet.

tilsætning af 5% v / v Æggeblommeemulsion muliggør påvisning af lipaseaktivitet af stafylokokker sammen med mannitolfermentering. Saltet rydder æggeblommeemulsionen, og lipaseproduktionen detekteres som gul uigennemsigtig zoneone omkring kolonierne.,

anvendelse af Mannitolsaltagar

1. det anvendes til selektiv isolering og differentiering af Staphylococcus aureus fra kliniske prøver.
2. det bruges også til tælling af stafylokokker i fødevarer og mejeriprodukter.
3. dette medium er også inkluderet i bakteriologisk analytisk Manual for kosmetik test.
4. det bruges også til bakteriologisk undersøgelse af svømmebassinvand, kurbade og drikkevand ved hjælp af membranfiltrering

tilberedning af Mannitolsalt Agar

1. suspendere 111.,025 gm af MRS media i 1000 ml destilleret vand.
2. kog for at opløse medierne fuldstændigt.
3. autoklave ved 121.C i 15-20 minutter.

(Valgfrit: tilsæt 5% v / V Æggeblommeemulsion)

1. afkøles til 45-50.C og hældes i petriskåle.,

Result Interpretation on Mannitol Salt Agar

Organisms	Results
Staphylococcus aureus	Yellow colonies with yellow zones.
Staphylococci other than S. aureus (e.g. Staphylococcus epidermidis )	Colorless or Red colonies with red zones.,
Streptococci	No growth to trace growth.
Micrococci	Large white to orange.
Gram-negative bacteria	No growth to trace growth.,

kvalitetskontrol på Mannitol Salt Agar

Positiv Kontrol: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Mellemstore gule kolonier

Negativ Kontrol: Escherichia coli ATCC 25922, Delvis til Fuldstændig Hæmning.

Begrænsninger af Mannitol Salt Agar

1. Flere Staphylococcus andre arter end aureus er mannitol positive og producere gule kolonier, omgivet af gule zoner på dette medie (fx S. capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans, og andre arter)., Derfor er yderligere biokemiske test nødvendige for identifikation af S. aureus eller andre arter.
2. de fleste andre organismer end stafylokokker hæmmes af den høje saltkoncentration, der findes i Mannitolsaltagar, bortset fra nogle halofilliske marine organismer.
3. nogle få stammer af Staphylococcus aureus kan udvise en forsinket gæring af mannitol. Negative plader skal re-inkuberes natten over før kassering.
4. Presumptive Staphylococcus aureus skal bekræftes med en koagulase test.

1. Mannitol Salt Agar. HiMedia.,
2. Mannitol Salt Agar (MSA) (Chapman Medium) European Pharmacopoeia, Usp.
3. Mannitol Salt Agar. Accumix.
4. Mannitol Salt Agar. Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France.
5. Mannitol Salt Agar. Remel.
6. Mannitol Salt Agar. PML Microbiologicals, Inc.
7. Mannitol Salt Agar. Acumedia Manufacturers, Inc.
8. Mannitol Salt Agar. Difco™ & BBL™ Manual, 2nd Edition
9. Mannitol Salt Agar. Liofilchem SRL.
10. BD Mannitol Salt Agar. Becton Dickinson GmbH.,
11. Mannitol Salt Agar (MSA). Hardy Diagnostik.
12. Mannitol Salt Agar. Dehydreret Kultur Medier. Thermo Fisher Scientific Inc.

---