Promega-forbindelser

0 Comments

det er med sorg, at vi genkender Dr. Frederick Sanger ‘ s bortgang. Sanger er kendt af molekylærbiologer og biokemikere over hele verden for sin DNA-sekventeringsteknik, som vandt for ham 1980 Nobelprisen i kemi.

også bemærkelsesværdigt udførte Sanger ‘ s laboratorium den første komplette genomsekvens, den af et viralt DNA-genom mere end 5.000 basepar i længden.1980-prisen var Sanger ‘ s anden Nobelpris, hans første tildelt i 1958 for at bestemme den kemiske struktur af proteiner., I dette arbejde belyste Sanger ikke kun de aminosyrer, der omfattede insulin, men også den rækkefølge, hvori aminosyrerne forekom.

om Sanger sekventering
Sanger DNA sekventering er også kendt som kæde-terminering metode til sekventering. Sanger-teknikken bruger dideo .ynukleotider eller ddNTPs ud over typiske deo .ynukleotider (dntps) i reaktionen. ddNTPs resulterer i afslutning af DNA-strengen, fordi ddNTPs mangler den 3′ – OH-gruppe, der kræves til dannelse af phosphodiesterbinding mellem nukleotider. Uden denne binding afsluttes kæden af nukleotider, der dannes.,Sanger-sekventering kræver et enkeltstrenget DNA, en DNA-primer (enten radioaktivt mærket eller med et fluorescerende tag), DNA-polymerase, dntps og ddntps. Fire reaktioner er oprettet, en for hvert nukleotid, G, A, T og C. I hver reaktion er alle fire dNTP ‘ er inkluderet, men kun en ddNTP (ddATP, ddCTP, ddGTP eller ddTTP) tilføjes. Sekventeringsreaktionerne udføres, og produkterne denatureres og adskilles efter størrelse ved hjælp af polyacrylamidgelelektroforese.

Diagram af Sanger dideoxy-sekventering., (Høflighed af Wikipedia og Estevez, J.)

Denne reaktion mix resultater med forskellige længder af fragmenter, som repræsenterer, for eksempel placering af hver En nukleotid i den rækkefølge, fordi mens der er mere dATP end ddATP i den reaktion, der er nok ddATP, at hver enkelt ATP i sidste ende i stedet er erstattet med en ddATP, hvilket resulterer i kæden opsigelse. Separation ved gelelektroforese afslører størrelsen af disse ddatp-holdige fragmenter, og dermed placeringen af alle et nukleotid i sekvensen. Lignende oplysninger findes for GTP, CTP og TTP.,

Ma .am-og Gilbert DNA-sekventeringsmetoden havde fordelen på tidspunktet for at blive brugt med dobbeltstrenget DNA. Denne metode krævede imidlertid DNA-strengseparation eller fraktionering af restriktionsen .ymfragmenterne, hvilket resulterede i en noget mere tidskrævende teknik sammenlignet med 1977-metoden offentliggjort af Sanger et al.

Dr. Sanger blev født i Gloucestershire, Storbritannien i 1918, søn af en læge. Selvom han oprindeligt planlagde at følge sin far ind i medicin, biokemi blev hans livslange lidenskab og forskningsområde., Sanger trak sig tilbage i en alder af 65 år for at tilbringe mere tid på hobbyer med havearbejde og sejlsport.


Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret. Krævede felter er markeret med *