Mannitolsalz-Agar zur Isolierung von Staphylococcus aureus

Mannitolsalz-Agar (MSA) wird als selektives und differentielles Medium zur Isolierung und Identifizierung von Staphylococcus aureus aus klinischen und nichtklinischen Proben verwendet. Es fördert das Wachstum einer Gruppe bestimmter Bakterien und hemmt gleichzeitig das Wachstum anderer. Es ist ein selektives Medium, das gemäß den Empfehlungen von Chapman zur Isolierung von mutmaßlichen pathogenen Staphylokokken hergestellt wurde.,

Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)

Ingredients	Gms / Litre
Pancreatic Digest of Casein	5.0 gm
Peptic Digest of Animal Tissue	5.0 gm
Beef Extract	1.,0 gm
Sodium Chloride	75.0 gm
D-Mannitol	10.0 gm
Phenol Red	0.025 gm
Agar	15.0 gm
Total	111. 025 gm

Distilled Water = 1000 ml

Final pH 7.4 ± 0.,2 bei 25°C.

Prinzip Mannitol Salz Agar

Mannitol Salz Agar enthält peptone und rindfleisch extrakt, die versorgung stickstoff, vitamine, mineralien und aminosäuren essentiell für wachstum. Die 7,5% ige Natriumchloridkonzentration führt zur teilweisen oder vollständigen Hemmung anderer bakterieller Organismen als Staphylokokken. Natriumchlorid liefert auch essentielle Elektrolyte für den transport und das osmotische Gleichgewicht. Mannitol ist das fermentierbare Kohlenhydrat, dessen Fermentation zur Säureproduktion führt, die durch den Phenolrot-Indikator nachgewiesen wird und die Differenzierung von Staphylokokkenarten unterstützt., Koagulase-positive Staphylokokken (z. B. Staphylococcus aureus) produzieren gelbe Kolonien und ein umgebendes gelbes Medium, während Koagulase-negative Staphylokokken rote Kolonien und keine Farbänderung des Phenolrotindikators produzieren. Agar ist das verfestigende agent.

Die Zugabe einer 5% igen v/v-Eigelbemulsion ermöglicht den Nachweis der Lipase-Aktivität von Staphylokokken zusammen mit der Mannitolfermentation. Das Salz löscht die Eigelb-Emulsion und Lipase-Produktion wird als gelbe undurchsichtige Zone um die Kolonien nachgewiesen.,

Verwendung von Mannitolsalz-Agar

1. Es wird zur selektiven Isolierung und Differenzierung von Staphylococcus aureus aus klinischen Proben verwendet.
2. Es wird auch zur Aufzählung von Staphylokokken in Lebensmitteln und Milchprodukten verwendet.
3. Dieses Medium ist auch im Bakteriologischen Analysehandbuch für kosmetische Tests enthalten.
4. Es wird auch bei der bakteriologischen Untersuchung von Schwimmbadwasser, Spas und Trinkwasser mittels Membranfiltration

Herstellung von Mannitolsalz-Agar

1. 11 verwendet.,025 g MRS-Medien in 1000 ml destilliertem Wasser.
2. Kochen, um die Medien vollständig aufzulösen.
3. Autoklav bei 121°C für 15-20 Minuten.

(Optional: 5% v/v Eigelbemulsion zugeben)

1. Auf 45-50°C abkühlen und in Petrischalen gießen.,

Result Interpretation on Mannitol Salt Agar

Organisms	Results
Staphylococcus aureus	Yellow colonies with yellow zones.
Staphylococci other than S. aureus (e.g. Staphylococcus epidermidis )	Colorless or Red colonies with red zones.,
Streptococci	No growth to trace growth.
Micrococci	Large white to orange.
Gram-negative bacteria	No growth to trace growth.,

Qualitätskontrolle auf Mannitol Salz Agar

Positive Kontrolle: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Mittelgroße gelbe kolonien

Negative Kontrolle: Escherichia coli ATCC 25922, Teilweise bis vollständige Hemmung.

Einschränkungen von Mannitolsalz-Agar

1. Mehrere andere Staphylococcus-Arten als Aureus sind Mannitol-positiv und produzieren gelbe Kolonien, die von gelben Zonen auf diesem Medium umgeben sind (z. B. S. capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans und andere Arten)., Daher sind weitere biochemische Tests zur Identifizierung von S. aureus oder anderen Arten erforderlich.
2. Die meisten anderen Organismen als Staphylokokken werden durch die hohe Salzkonzentration im Mannitolsalz-Agar gehemmt, mit Ausnahme einiger halophiller Meeresorganismen.
3. Einige Stämme von Staphylococcus aureus können eine verzögerte Fermentation von Mannitol aufweisen. Negative Platten sollten vor dem Abwerfen über Nacht erneut inkubiert werden.
4. Der mutmaßliche Staphylococcus aureus muss mit einem Koagulase-Test bestätigt werden.

1. Mannitol-Salz-Agar. HiMedia.,
2. Mannitol Salt Agar (MSA) (Chapman Medium) European Pharmacopoeia, Usp.
3. Mannitol Salt Agar. Accumix.
4. Mannitol Salt Agar. Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France.
5. Mannitol Salt Agar. Remel.
6. Mannitol Salt Agar. PML Microbiologicals, Inc.
7. Mannitol Salt Agar. Acumedia Manufacturers, Inc.
8. Mannitol Salt Agar. Difco™ & BBL™ Manual, 2nd Edition
9. Mannitol Salt Agar. Liofilchem SRL.
10. BD Mannitol Salt Agar. Becton Dickinson GmbH.,
11. Mannitol Salz Agar (MSA). Hardy Diagnostics.
12. Mannitol-Salz-Agar. Dehydrierte Kulturmedien. Thermo Fisher Scientific Inc.

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