Dolly a los 20: la historia interna de la oveja más famosa del mundo

Dolly, el primer mamífero clonado a partir de una célula adulta, nació el 5 de julio de 1996. Pero fue creada cinco meses antes, en una pequeña habitación en el Instituto Roslin, en las afueras de Edimburgo, Reino Unido.

Karen Walker, embrióloga, PPL Therapeutics: el día que hicimos Dolly, tuvimos un día horrible.,

Bill Ritchie, embriólogo, Instituto Roslin: fue el 8 de febrero de 1996. Lo busqué. Sabemos que fue un día horrible: tuvimos varios problemas con infecciones y cosas.

Walker: es una pena que el edificio haya sido demolido, de lo contrario se podría ver la habitación en la que se hizo Dolly. Uso la palabra «habitación» libremente, porque en realidad era solo un gran armario, que, cuando Bill y yo estábamos allí, podías conseguir dos sillas y la incubadora.

Ritchie: literalmente era el armario. Era el armario de almacenamiento al final del laboratorio., Cuando tuvimos equipos de cámaras más tarde, no podían creerlo, no había espacio para filmar.

Walker y Ritchie formaron parte de un proyecto en el Instituto Roslin y la spin-off PPL Therapeutics, con el objetivo de realizar cambios genéticos precisos en los animales de granja., El equipo científico, dirigido por el embriólogo de Roslin Ian Wilmut, razonó que la mejor manera de hacer estos cambios sería modificar el genoma de una célula en cultivo y luego transferir el núcleo a una nueva célula.

Ritchie: la forma sencilla de describir la transferencia nuclear es que se toma un ovocito, un óvulo no fertilizado, y se extraen los cromosomas. Luego tomas una célula completa que contiene cromosomas masculinos y femeninos — todas nuestras células lo hacen, excepto las gónadas., Tomas esa célula y la fundes en el óvulo enucleado, la activas, lo que hace que crezca, y la transfieres a una madre sustituta. Con suerte, con los dedos cruzados, obtendrás una descendencia clonada, una copia del animal del que tomaste esa célula.

Walker: Tedioso es absolutamente la palabra. Estás sentado, mirando un microscopio y tienes ambas manos en los micromanipuladores. Es como los joysticks que los niños usan hoy en día en los juegos. Si se te resbalara el codo, podrías limpiar todo el plato.,

un año antes, el equipo había producido ovejas gemelas, llamadas Megan y Morag, mediante la clonación de células embrionarias cultivadas en un esfuerzo encabezado por el biólogo de desarrollo de Roslin Keith Campbell. Pero en este día de febrero de 1996, los problemas con las líneas celulares fetales que habían planeado usar significaron que necesitarían otro donante nuclear.

Walker: mi memoria es de aletear como un pollo, pensando, » ¿Qué vamos a poner?»porque las células que íbamos a usar no están ahí. Lo último que quieres hacer es desperdiciar esos ovocitos que tienes. Queríamos intentar algo, al menos.,

Angela Scott, técnica de cultivo celular, PPL: Karen me dijo que las células que esperaban habían sido contaminadas. Me preguntaron si tenía células que pudieran usar. Las células que tenía eran células epiteliales mamarias ovinas: estábamos buscando aumentar la expresión de proteínas en la leche. Estas eran células adultas.

Alan Colman, director de investigación, PPL: yo venía de un fondo de transferencia nuclear con John Gurdon . Nunca pudo conseguir una rana adulta usando transferencia nuclear de un donante de células adultas., Pudo conseguir renacuajos usando células adultas, pero nunca pudo conseguir una rana adulta. No pensé que funcionaría con células adultas en absoluto. Pero no teníamos otra línea celular con la que ir, así que todos acordamos que usaríamos estas células de la glándula mamaria y ver lo que pasó, ganar algo de experiencia. Estos eran de una oveja de 6 años de edad-de mediana edad para una oveja.

Ian Wilmut, embriólogo, Roslin: esto es algo que está mal hasta el día de hoy. Dolly se describe como el primer mamífero clonado a partir de una célula adulta. En realidad es el primer clon adulto, punto. Ella es a menudo infravalorado.,

aunque las vacas clonadas y transgénicas serían más valiosas para la industria, el equipo de Roslin trabajó con ovejas por razones prácticas.

Wilmut: el ganado es increíblemente caro y tiene un largo intervalo de generación. Las ovejas son mucho menos costosas y mucho más fáciles de trabajar. Y conocíamos la biología reproductiva. Era muy probable que si podíamos hacer que algo funcionara en las ovejas, funcionaría en las vacas. Las ovejas son vacas Pequeñas y baratas.

John Bracken, asistente de Investigación Agrícola, Roslin: habría 40-60 animales sometidos a cirugía cada semana durante la temporada de cría., Hay muchas ovejas diferentes en el sistema, y eso tuvo que ser monitoreado con mucha precisión para que los animales estuvieran en el lugar correcto en el momento correcto.

Walker: Bill solía guardar los embriones y ovocitos — cuando los traía de vuelta de la granja-en el bolsillo de su camisa superior. No tenía un bolsillo en la parte superior de la camisa, así que solía meterlas dentro de mi sujetador. Era una forma de mantenerlos calientes y traerlos de vuelta al laboratorio y llevarlos a un ambiente controlado. No creo que mi sostén estuviera terriblemente controlado, pero tampoco el bolsillo de la camisa de Bill.,

Ritchie: el día que hicimos Dolly, yo habría hecho la enucleación, y ella habría hecho la fusión. Esa era nuestra forma normal de hacer las cosas.

Walker: hice la fusión el día que hicimos Dolly. Bill y yo bromeamos, que él es la madre y yo soy el Padre porque, esencialmente, yo era el imitador de lo que el esperma haría.

transfirieron 277 núcleos de la línea celular mamaria-de una raza de cara blanca conocida como Finn Dorset — a huevos de la raza de cara negra Escocesa resistente. Solo 29 de los embriones resultantes fueron implantados en ovejas sustitutas. Las expectativas eran bajas: parecía casi imposible que un núcleo celular adulto pudiera reprogramarse para dar lugar a un animal vivo. La mayoría de los embriones clonados abortaron, muchos incluso antes de que se pudiera determinar un embarazo con ultrasonido.

Wilmut: la temporada de cría de ovejas comienza en octubre y termina en febrero, más o menos marzo., Para Navidad, habíamos establecido embarazos después de la transferencia de células fetales, así que eso iba bien. Si no hubiéramos hecho eso, probablemente no habríamos apostado a trabajar con lo que se convirtió en Dolly, las células mamarias.

Angelika Schnieke, bióloga molecular, PPL: recuerdo haber conocido a Ian Wilmut en la cantina, y era muy escéptico. Dijo:»me sorprendería si funciona, pero PPL está pagando por los experimentos, así que los estamos haciendo.»

Bracken: escaneamos a todos los receptores que tenían embriones transferidos, y sabíamos que eran ovejas importantes., Cada día que los científicos supieran que estábamos escaneando, estarían muy interesados en saber si había algún embarazo.

Walker: no bajé a ver todos los escaneos. Pero con Dolly-porque sabíamos que esas eran células que Bill y yo habíamos puesto — yo había caído ese día en particular con John.

Bracken: estaba muy contenta de que fuera un embarazo. No me di cuenta de la verdadera importancia porque no nos lo dijeron. Sabíamos que era un embarazo importante. No tenía el mismo peso. No estábamos pensando, » Wow!, Si esto progresa a un cordero vivo, esto va a ser un golpeador mundial, o va a cambiar la comprensión científica de cabeza.»

Walker: tomé un video en blanco conmigo, para que pudiera mostrar a mis colegas. Ese video está en mi loft, y para mi vergüenza, nunca lo he transferido a un DVD. Debería.

Schnieke: recuerdo el día en que tuvimos la primera exploración. Siempre preguntamos. Y luego vimos la foto y los escaneos. Entonces solo tienes que esperar que dure y llegue hasta el final.,

Wilmut: mi memoria es que estaban mirando alrededor del día 30 o 35, Así que hay otros 120 días, donde sigues suspirando con alivio y esperanza.

solo algunos de los miembros del equipo pudieron presenciar su nacimiento.

Bracken: sucedió alrededor de las 4:30 de la tarde. Tan pronto como se puso de parto, llamamos al veterinario Dick para que uno de sus veterinarios saliera., A pesar de que Douglas McGavin y yo probablemente teníamos 50 años de experiencia entre nosotros, simplemente habría sido inaudito si hubiéramos decidido que asistiríamos al nacimiento y algo hubiera salido mal.

Ritchie: sabíamos que Dolly estaba a punto de nacer, y creo que estaba mostrando signos de estar cerca del parto, y he aquí que pasé y había trozos de Dolly naciendo. Había un veterinario allí, así que se aseguró de que el animal estuviera bien y sacó el cordero.

Bracken: era absolutamente normal. Sin complicaciones en absoluto. Era un cordero muy viable., Se puso de pie muy rápido, probablemente dentro de la primera media hora, lo que es una muy buena indicación de que las cosas están normales.

Ritchie: creo que estaba saltando arriba y abajo cuando vi esa cara blanca.Karen estaba fuera en una boda en ese momento.

Walker: le había dado el número de fax del hotel. Ojalá hubiera guardado ese fax. Decía: «tiene la cara blanca y las piernas peludas.»

Scott: no sé lo que deben haber pensado en el hotel: «Wow, ese es un bebé realmente inusual.»

Wilmut: yo estaba en la asignación. Tuve una llamada para decir que teníamos un cordero vivo., Di una instrucción de que nadie debería estar allí que no tuviera que estar allí. Muchos eran curiosos. Obedecí mi propia regla porque no tenía nada que aportar.

Bracken: estoy de pie junto a Douglas McGavin viendo al veterinario asistir a este parto, e hice un comentario improvisado a Douglas. Le dije: «¿Sabes cómo vamos a llamar a este cordero? Vamos a tener que llamarlo Dolly, después de Dolly Parton, porque las células se derivan del tejido mamario.

Wilmut: siendo algo puritano, podría haber estado un poco preocupado. En retrospectiva, sin duda fue un gran nombre.,

Bracken: esto son rumores. Nunca me dijeron esto directamente. Pero escuché que contactaron a Dolly Parton y dijeron: «Tenemos esta oveja clonada que lleva tu nombre.»

Wilmut: no sé cómo llegó el mensaje, pero nos dijeron que su agente había dicho: «no había tal cosa como la publicidad de baaad.»No sé si eso es cierto.

durante los siguientes meses, el equipo de Wilmut confirmó que Dolly era un clon de la línea celular mamaria, y escribió los resultados. Su nacimiento se mantendría en alto secreto, hasta que el artículo de Nature describiendo el experimento pudiera ser publicado en febrero de 1997 (I., Wilmut et al. Nature 385, 810-813; 1997).

Harry Griffin, director científico, Roslin: dos o tres meses antes de la publicación del artículo, lo conocí. In terms of preparation, PPL were involved. Lo vieron como una oportunidad para conseguir publicidad por sí mismos. Trabajamos con su compañía de Relaciones Públicas, de Facto. Hicimos un poco de preparación.,

Wilmut: Ron James, que era el director ejecutivo de PPL therapeutics, y yo fuimos citados como los voceros principales y nos dieron un poco de entrenamiento por personas de la ex-BBC, que primero se acercaron y nos pegaron micrófonos bastante agresivamente en las narices y nos hicieron preguntas agresivas, y posteriormente lo hicieron muy suavemente. No nos acercamos a la forma agresiva que intentaron primero, lo cual fue bastante impactante. Estoy seguro de que valió la pena.

Griffin: teníamos todo organizado., Los llamados se dirigirían de Facto y tratarían de organizar cierta coherencia en nuestra respuesta en términos de quién obtuvo prioridad y quién no. todo esto culminaría, esperábamos, el jueves que salió el periódico. ¿Qué fue eso, el 27 de febrero? Claramente, no lo hizo.

Wilmut: Robin McKie de The Observer lo filtró. Negará la acusación.

Robin McKie, editor de ciencia y Tecnología, The Observer, Londres: no vi esas cosas en la naturaleza. No lo culpo por estar enojado, pero me esforcé mucho para evitar las cosas que me harían ser acusado de eso., Había ayudado a un par de tipos que estaban haciendo un programa de televisión sobre genética, y dijeron: «Ah, por cierto, han clonado una oveja en Edimburgo.»No les creí, pero llamé a algunas personas en el campo, y uno de ellos en Estados Unidos lo confirmó. Pero estaba muy, muy preocupado. Estaba diciendo algo bastante sensacional, sin absolutamente ninguna prueba de papel de nada de lo que había pasado. Le dije a mi subdirector todo lo que sabía, y me hizo escribirlo. Entonces la mierda golpeó el ventilador.,

Griffin: Ian me dio una llamada y dijo que él » d acaba de ser llamado y le dijo que el observador iba a ejecutar la historia el domingo antes de la publicación en la naturaleza.

Ian y yo fuimos al Instituto alrededor de las 9 a. m. del domingo, sin saber si la gente podía pasar o no. El teléfono sonó continuamente. Tuvimos una extraña circunstancia en la que un teléfono comenzó a sonar en un armario de limpieza. Cuando contesté, fue, creo, el Daily Mirror, quien de alguna manera había conseguido esta conexión en particular. Alrededor de las nueve y media de la noche, nos fuimos a casa.,

Jim McWhir, científico de células madre, Roslin: recuerdo haber llegado el día después de que se rompiera el embargo y había varias furgonetas satélite en el aparcamiento.

Wilmut: había camiones de televisión por todas partes. Fui y hablé en Good Morning America.

Griffin: CBS, NBC, ABC, BBC, todos allí queriendo entrevistas con Ian, queriendo ver las ovejas. Fue un caos. No creo que puedas apreciar la intensidad de los medios en pleno vuelo a menos que lo hayas experimentado tú mismo.

McWhir: era simplemente pandemonium. Bajando a la unidad de animales grandes, era solo un bosque de bombillas y reporteros. Fue bastante increíble. Me di la vuelta y volví al trabajo.

Griffin: mi secretaria dejaba el teléfono, y estaba sonando inmediatamente. Uno de los nombres que oí ser mencionado era Harold Shapiro . Ella dijo, » Ian Wilmut no puede hablar contigo ahora, ¿puedes llamar más tarde?,»Bill Clinton le había pedido que informara dentro de 90 días sobre las implicaciones éticas de la clonación. Escuché su nombre y dije: «no, definitivamente queremos hablar con él.»

Colman: cuando estás incrustado en un proyecto, tienes lo que consideras buenas razones científicas para hacerlo. Todo lo que hicimos fue cubierto por un comité de ética. Habíamos pasado por muchas preocupaciones sobre la salud animal. Nuestra preocupación era más sobre ese tipo de reacción. No lo hacíamos como preludio a la clonación humana.

Griffin: la gente en los medios presionó este punto repetidamente., Nos acusaron de mantener el secreto de nacimiento de Dolly porque estábamos contemplando la clonación de un humano. Teníamos nuestra posición clara al respecto: era poco ético e inseguro.

Wilmut: va con el trabajo. Solo tienes que explicar que este no es el caso.

Schnieke: en Europa, fue visto inmediatamente como negativo. «¿Qué han hecho ahora y qué podrían hacer a continuación?»Teníamos policías en el instituto que explicaban lo que se hacía si había un susto de bomba. Los paquetes estaban siendo revisados en busca de explosivos.,

Walker: recuerdo a la asistente personal de Ian Wilmut, Jackie, recibiendo llamadas telefónicas después de que todo saliera a la prensa. Tenía un montón de llamadas, algunas de ellas eran un poco chifladas, de personas que querían clonar a sus perros. Los más tristes eran aquellas personas que habían perdido hijos o que tenían enfermedades ellos mismos, y esto iba a ser un avance que podría curar diferentes enfermedades.

Colman: Dolly parecía capturar la imaginación. Era un animal peludo. Tener un nombre que fuera identificable ayudó enormemente.,

Bracken: si ella hubiera sido vista como un animal que estaba encerrado, que no mucha gente vio, eso podría haber perpetuado más mala publicidad. Pero creo que, debido a la apertura, que a la gente se le permitió ir a visitarla y ser mostrada alrededor, esto ayudó en la aceptación del público.

Griffin: actuó bien para la cámara, y todo el mundo podía ver que era un animal perfectamente normal. Debido a que era accesible y fotogénica, se convirtió en la oveja más famosa del mundo. Cualquier gerente de marketing habría matado por ello., En algunas de las fotos es como si estuviera entrevistando a los medios de comunicación.

Walker: llevé a un fotógrafo a ver a Dolly. Este tipo produjo una corona de fiesta para niños, una cosita de oro. Le dije: «No creo que debamos.»Todos estábamos muy interesados en No permitir que Dolly se humanizara. Era una oveja y eso fue todo.

Bracken: lejos de los medios y las cámaras, tratamos de tratarla como a las otras ovejas, no como una especie de celebridad, en la que obviamente se convirtió.,

Walker: la primera vez que fue esquilada, tomaron la lana — de la que tengo algo, en realidad — para ser tejida en un jersey para una caridad de fibrosis Quística. La has visto en el museo? Ahora está detrás de una vitrina porque la gente le quitaba trozos de lana. Al menos conseguí mi lana mientras ella aún estaba viva.

Dolly vivió seis años y medio y dio a luz a varios corderos. Pero en 2003, comenzó a mostrar signos de enfermedad.era el día de San Valentín. Creo que era viernes. Sabíamos que existía la posibilidad de que esta enfermedad pulmonar se hubiera desarrollado.,

Griffin: sufría de una enfermedad llamada jaagsiekte. Es una enfermedad de los pulmones y una o dos ovejas más habían caído con ella.

Wilmut: pensaron que debería ser radiografiada en la escuela de veterinaria. Se sorprendieron del tamaño del tumor en sus pulmones. Debatimos, en estas circunstancias, lo duro que debemos luchar para que se recupere. ¿No sería mejor dejarla ir? Así que le practicamos la eutanasia. Usted es responsable del bienestar de los animales en su proyecto.,

una década más tarde, otra pérdida golpeó al equipo científico con la muerte de Keith Campbell.

Colman: Keith fue la fuerza impulsora. Él fue la persona que hizo el importante trabajo experimental que sembró las semillas del protocolo que todos usamos. Dolly no habría pasado sin Keith.

Ritchie: Keith era, supongo, «inusual» es probablemente lo que dirías de él. Era bastante hippy., Conducía un Volkswagen Beetle, fumaba roll-ups, tenía el pelo largo.

Colman: no tenía una gran relación con Ian. Eran personalidades muy diferentes y a menudo discutían.

Wilmut: no recuerdo filas. A veces habríamos tenido prioridades ligeramente diferentes.

siempre es muy difícil dividir el reconocimiento. Lo que obviamente fue la causa de alguna molestia y algunas críticas es que no obtuvo la primera autoría en el papel de Dolly. Se llevó absolutamente a todos los demás. Hubo un tiempo en que dijo que el papel de Megan y Morag era en realidad más importante que Dolly., Definitivamente se sintió frustrado porque obtuve un FRS (miembro de la Royal Society) y, en última instancia, un título de caballero.

después de una disputa doméstica, Campbell se suicidó el 5 de octubre de 2012.

Colman: Keith era un muy buen amigo mío y solíamos ir en bicicleta de montaña en Escocia por las noches después del trabajo. Hablé con él tres días antes de que muriera. Estaba muy sorprendido.

Walker: eso me golpeó muy duro, más duro de lo que hubiera imaginado. No lo había visto en muchos, muchos años. Éramos un grupo muy unido en ese momento. Teníamos que ser.,

Colman: fui a una reunión en París en enero pasado, donde tuvieron un premio póstumo. Hicieron una encuesta de cuántas personas en la audiencia habían sido ayudadas por lo que Keith había hecho, y un gran número de personas levantaron las manos.

las técnicas desarrolladas en la creación de Dolly se utilizaron para copiar ganado valioso y hacer animales transgénicos. Pero en los laboratorios biomédicos, Dolly insinuó un futuro en el que las células podrían reprogramarse a un estado similar al embrión y usarse para tratar enfermedades humanas.,

Wilmut: el nacimiento de Dolly puso las reglas del desarrollo patas arriba, e hizo que muchos biólogos pensaran de manera diferente.

Jeanne Loring, bióloga de células madre, Instituto de Investigación Scripps, La Jolla, California: ese fue el inicio de la clonación de ganado, que en realidad es bastante popular ahora. Hay un valor tremendo en poder mejorar el ganado, y esto le dio a la gente otra herramienta.

George Seidel, biólogo de reproducción animal, Universidad Estatal de Colorado, Fort Collins: hay toros clonados produciendo semen que se está vendiendo., Hay un toro Angus llamado respuesta Final, tiene medio millón de crías o algo así. Así que su clon se llama respuesta Final II, y puedes comprar su semen a mitad de precio. Mi esposa y yo tenemos un rancho de ganado, así que usamos la respuesta final II. Pero desde un punto de vista teórico, el material transgénico es realmente mucho más importante que simplemente hacer copias. Para hacer nuestra primera vaca transgénica, creamos miles de embriones. Fue un gran esfuerzo. Una décima parte del dinero, una décima parte de los animales es lo que los transgénicos más la clonación podrían hacer por ti.,

Robert Lanza, director científico, Astellas Institute for Regenerative Medicine, Marlborough, Massachusetts: estaba emocionado. Ahora podríamos aplicar la misma técnica-no tanto para los animales y la agricultura-sino para tratar una larga lista de enfermedades humanas. Lo que Dolly mostró fue el enorme poder de esa tecnología y la magia del huevo. Había factores en el óvulo que podían llevar las células adultas hacia atrás en el tiempo y restaurarlas a un estado embrionario.

Shinya Yamanaka, científico de células madre, Universidad de Kyoto, Japón: mi respuesta inicial fue » ¡Wow!, Es como ciencia ficción.»Pero no era algo en lo que planeaba trabajar. A juzgar por el papel, el proceso de clonación es técnicamente difícil. Al año siguiente, salió el primer papel de células madre embrionarias humanas. Fue entonces cuando reevalué a Dolly. Pensé, al menos en teoría, que deberíamos ser capaces de reprogramar las células somáticas de nuevo en el estado embrionario para que podamos hacer es-como células madre directamente de las células de la piel o la sangre.

McWhir: un resultado como Dolly detiene a la gente en sus pistas, y dicen: «Bueno, espera. Si hubiera dicho que eso es imposible, ¿qué más Estoy diciendo que es imposible?,»

Schnieke: tienes algunos experimentos en los que sacas los latidos del corazón. Dolly era una.

Ritchie: es como tener hijos. Yo no tengo nada. Tal vez Dolly es esa clase de niña.

Wilmut: sería un error decir que mi nombre es conocido en todo el mundo, pero Dolly lo es.

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