Promega Yhteydet
– Se on surua, että me tunnustamme kulkee Tohtori Frederick Sanger. Sanger on tunnettu molekyyli biologien ja biokemistien maailmanlaajuisesti hänen DNA-sekvensointi tekniikka, joka voitti hänet vuonna 1980 Nobelin Kemian.
Myös huomionarvoista, Sanger on laboratoriossa suoritettu ensimmäinen täydellinen genomin, että virus-DNA-genomin yli 5000 emäsparin pituus.
1980-palkinto oli Sanger on toinen Nobel-palkinto, hänen ensimmäinen myönnettiin vuonna 1958 määrittämiseksi kemiallisen rakenteen proteiineja., Tässä työssä, Sanger selvitetty paitsi aminohappoja, jotka muodostuivat insuliinia, mutta myös järjestys, jossa aminohapot tapahtunut.
Noin Sanger Sekvensointi
Sanger DNA-sekvensointi on myös tunnettu ketju-irtisanominen menetelmä sekvensointi. Sanger-tekniikassa käytetään reaktiossa tyypillisten deoksinukleotidien (dNTPs) lisäksi dideoksinukleotideja tai ddNTPs: ää. ddNTPs johtaa DNA-juosteen päättymiseen, koska ddNTPs: ltä puuttuu nukleotidien väliseen fosfodiesterisidoksen muodostumiseen tarvittava 3′-OH-ryhmä. Ilman tätä sidosta muodostuva nukleotidien ketju päättyy.,
Sanger sekvensointi vaatii yksijuosteisen DNA: n, DNA-aluke (joko radioaktiivisesti tai loisteputki tag), DNA-polymeraasia, dNTPs ja ddNTPs. Neljä reaktiot ovat perustettu, yksi kunkin nukleotidin, G, A, T ja C. jokainen reaktio kaikki neljä dNTPs ovat mukana, mutta vain yksi ddNTP (ddATP, ddCTP, ddGTP tai ddTTP) on lisätty. Sekvensointireaktiot suoritetaan ja tuotteet denaturoidaan ja erotetaan koon mukaan polyakryyliamidigeelielektroforeesilla.
Tämä reaktio sekoita tulokset eri pituisia palasia, jotka edustavat esimerkiksi sijainti kunkin nukleotidin järjestyksessä, koska aikaa on enemmän dATP kuin ddATP reaktio, siellä on tarpeeksi ddATP, että jokainen ATP viime kädessä sen sijaan korvataan ddATP, jolloin ketjun päättymisen. Erottaminen geelielektroforeesilla paljastaa näiden ddATP: tä sisältävien fragmenttien koon ja siten kaikkien nukleotidin sijainnit sekvenssissä. Samanlaisia tietoja annetaan GTP: stä, CTP: stä ja TTP: stä.,
Maxam-ja Gilbert-DNA-sekvensointimenetelmällä oli tuolloin etulyöntiasema, kun sitä käytettiin kaksijuosteisen DNA: n kanssa. Kuitenkin, tämä menetelmä vaaditaan DNA-juosteen erottaminen tai jakotislaamalla restriction entsyymi-fragmentteja, mikä on hieman enemmän aikaa vievää tekniikkaa, verrattuna 1977 menetelmä julkaissut Sanger ym.
tohtori Sanger syntyi Gloucestershiressä, Isossa-Britanniassa vuonna 1918, lääkärin poikana. Vaikka hän alun perin aikoi seurata isäänsä lääketieteeseen, biokemiasta tuli hänen elinikäinen intohimonsa ja tutkimusalueensa., Sanger jäi eläkkeelle 65-vuotiaana viettääkseen enemmän aikaa puutarhanhoidon ja Veneilyn harrastuksissa.