La gélose au sel de Mannitol pour l’isolement de Staphylococcus aureus

La gélose au sel de Mannitol (MSA) est utilisée comme milieu sélectif et différentiel pour l’isolement et l’identification de Staphylococcus aureus à partir d’échantillons cliniques et non cliniques. Il encourage la croissance d’un groupe de certaines bactéries, tout en inhibant la croissance des autres. C’est un milieu sélectif préparé selon les recommandations de Chapman pour l’isolement des staphylocoques pathogènes présumés.,

Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)

Ingredients	Gms / Litre
Pancreatic Digest of Casein	5.0 gm
Peptic Digest of Animal Tissue	5.0 gm
Beef Extract	1.,0 gm
Sodium Chloride	75.0 gm
D-Mannitol	10.0 gm
Phenol Red	0.025 gm
Agar	15.0 gm
Total	111. 025 gm

Distilled Water = 1000 ml

Final pH 7.4 ± 0.,2 à 25°c.

principe de la gélose au sel de Mannitol

La gélose au sel de Mannitol contient des peptones et de l’extrait de bœuf, qui fournissent de l’azote, des vitamines, des minéraux et des acides aminés essentiels à la croissance. La concentration de 7,5% de chlorure de sodium entraîne l’inhibition partielle ou complète des organismes bactériens autres que les staphylocoques. Le chlorure de Sodium fournit également des électrolytes essentiels pour le transport et l’équilibre osmotique. Le Mannitol est l’hydrate de carbone fermentescible, dont la fermentation conduit à la production d’acide, détectée par un indicateur rouge phénol, aide à la différenciation des espèces staphylococciques., Les staphylocoques positifs à la Coagulase (par exemple, Staphylococcus aureus) produisent des colonies jaunes et un milieu jaune environnant, tandis que les staphylocoques négatifs à la coagulase produisent des colonies rouges et aucun changement de couleur de l’indicateur rouge du phénol. La gélose est l’agent solidifiant.

L’ajout d’une émulsion de jaune d’oeuf à 5% v / v permet la détection de l’activité lipase des staphylocoques avec la fermentation du mannitol. Le sel efface l’émulsion de jaune d’oeuf et la production de lipase est détectée comme une zone opaque jaune autour des colonies.,

utilisations de la gélose au sel de Mannitol

1. Il est utilisé pour l’isolement sélectif et la différenciation de Staphylococcus aureus à partir d’échantillons cliniques.
2. Il est également utilisé pour le dénombrement des staphylocoques dans les aliments et les produits laitiers.
3. ce milieu est également inclus dans le manuel D’analyse bactériologique pour les tests cosmétiques.
4. Il est également utilisé dans l’examen bactériologique de l’eau de piscine, des spas et de l’eau potable par filtration membranaire

préparation de la gélose au sel de Mannitol

1. suspendre 111.,025 g de média MRS dans 1000 ml d’eau distillée.
2. faire bouillir pour dissoudre complètement le milieu.
3. Autoclave à 121°C pendant 15-20 minutes.

(facultatif: ajouter une émulsion de jaune d’oeuf à 5% v/v)

1. refroidir à 45-50°C et verser dans des boîtes de Pétri.,

Result Interpretation on Mannitol Salt Agar

Organisms	Results
Staphylococcus aureus	Yellow colonies with yellow zones.
Staphylococci other than S. aureus (e.g. Staphylococcus epidermidis )	Colorless or Red colonies with red zones.,
Streptococci	No growth to trace growth.
Micrococci	Large white to orange.
Gram-negative bacteria	No growth to trace growth.,

contrôle qualité sur gélose au sel de Mannitol

contrôle positif: Staphylococcus aureus ATCC 6538, colonies jaunes de taille moyenne

contrôle négatif: Escherichia coli ATCC 25922, Inhibition partielle à complète.

limites de la gélose au sel de Mannitol

1. plusieurs espèces de staphylocoques autres que aureus sont positives au mannitol et produisent des colonies jaunes entourées de zones jaunes sur ce milieu (p. ex. S. capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans et d’autres espèces)., Par conséquent, d’autres tests biochimiques sont nécessaires pour l’identification de S. aureus ou d’autres espèces.
2. la plupart des organismes autres que les staphylocoques sont inhibés par la forte concentration de sel trouvée dans la gélose au sel de Mannitol, à l’exception de certains organismes marins Halophiles.
3. quelques souches de Staphylococcus aureus peuvent présenter une fermentation retardée du mannitol. Les plaques négatives doivent être ré-incubées pendant la nuit avant de les jeter.
4. la présomption de Staphylococcus aureus doit être confirmée par un test de coagulase.

1. gélose au sel de Mannitol. HiMedia.,
2. Mannitol Salt Agar (MSA) (Chapman Medium) European Pharmacopoeia, Usp.
3. Mannitol Salt Agar. Accumix.
4. Mannitol Salt Agar. Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France.
5. Mannitol Salt Agar. Remel.
6. Mannitol Salt Agar. PML Microbiologicals, Inc.
7. Mannitol Salt Agar. Acumedia Manufacturers, Inc.
8. Mannitol Salt Agar. Difco™ & BBL™ Manual, 2nd Edition
9. Mannitol Salt Agar. Liofilchem SRL.
10. BD Mannitol Salt Agar. Becton Dickinson GmbH.,
11. gélose au sel de Mannitol (MSA). Hardy Diagnostics.
12. gélose au sel de Mannitol. Milieux De Culture Déshydratés. Thermo Fisher Scientific Inc.

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