les effets anxiolytiques de L’huile essentielle de bergamote sont insensibles au flumazénil chez le rat

résumé

Les troubles anxieux sont l’un des troubles mentaux les plus courants, et les benzodiazépines (BDZ), agissant sur le complexe récepteur de l’acide gamma-aminobutyrique de type A (GABA-A), représentent les médicaments antianxiété Cependant, L’utilisation chronique de BDZ provoque plusieurs effets indésirables. Apparemment, l’aromathérapie est plus sûre pour la gestion de l’anxiété., L’huile essentielle de bergamote (BEO) extraite des agrumes bergamia Risso et Poiteau, comme d’autres huiles essentielles, est largement utilisée en aromathérapie pour soulager les symptômes de l’anxiété induite par le stress. Fait intéressant, les données précliniques indiquent que BEO induit des effets anxiolytiques/relaxants dans les tâches comportementales animales Non superposables à celles de la benzodiazépine diazépam. Pour mieux élucider l’implication de la transmission GABAergique, la présente étude examine les effets du prétraitement avec le flumazénil (FLZ), un antagoniste du site benzodiazépine, sur les effets de BEO en utilisant la tâche en plein champ (OFT) chez le rat., Les données fournies montrent que FLZ n’affecte pas significativement les effets comportementaux du phytocomplexe. Ces résultats démontrent l’absence de chevauchement entre les effets comportementaux BEO et BDZ, contribuant à la caractérisation du profil neurobiologique de l’huile essentielle pour son utilisation rationnelle en aromathérapie.

1. Introduction

plusieurs huiles essentielles extraites de fruits appartenant au genre Citrus sont utilisées en aromathérapie pour traiter l’anxiété, le sommeil, l’humeur et les troubles cognitifs . On suppose que la bergamote provient de Citrus aurantium L. et Citrus limon L., ou Citrus aurantifolia Swing . L’huile essentielle de bergamote (BEO) est obtenue par pressage à froid de l’épicarpe et, en partie, du mésocarpe du fruit frais D’agrumes bergamia Risso et Poiteau, selon la Pharmacopée italienne XII ed. BEO comprend une fraction volatile (93-96% du total) contenant des dérivés oxygénés (tels que le linalol) et des hydrocarbures sesquiterpènes et monoterpènes (tels que le limonène) et une fraction non volatile (4-7% du total) contenant des flavones polyméthoxylées, des cires, des coumarines et des psoralènes tels que la bergamottine (5-géranyloxypsoralène) et le bergaptène (5-méthoxypsoralène) ., Le limonène, le γ-terpinène et le β-pinène, ainsi que le linalol et l’acétate de linalyle sont parmi les composés les plus abondants trouvés dans la fraction volatile et tous ensemble constituent >90% de l’huile entière . Au cours de la dernière décennie, des études précliniques ont soutenu l’utilisation thérapeutique de BEO. En particulier, l’huile de bergamote est dotée d’effets neurobiologiques remarquables dérivant partiellement d’une interférence avec des mécanismes de base ajustant finement la plasticité synaptique dans des conditions physiologiques et pathologiques, c’est-à-dire,, ischémie cérébrale , douleur et symptômes comportementaux et psychologiques de la démence . En condition basale, BEO élève les niveaux extracellulaires d’acides aminés discrets avec une fonction neurotransmetteur après administration systémique ou focale dans l’hippocampe de rats en mouvement libre . De plus, les doses systémiques de BEO augmentent le corrélat électrocorticographique de l’alerte, de l’éveil et de la relaxation ., La capacité de BEO à modifier la fréquence de L’EEG, liée à l’alerte et à la relaxation, appuie les données montrant des effets anxiolytiques-relaxants après l’administration systémique ou inhalée de ce phytocomplexe dans les tâches comportementales animales. Fait intéressant, des résultats controversés sont obtenus en comparant les effets du BEO avec ceux du diazépam (DZP). En fait, alors que Saiyudthong et Marsden spéculent que les composants actifs du phytocomplexe interagissent avec le site BDZ sur GABA-un complexe récepteur induisant des effets anxiolytiques, nous avons récemment démontré que les propriétés de BEO ne chevauchent pas avec les effets de DZP ., Étant donné que la transmission GABAergique joue un rôle clé dans la physiopathologie des troubles anxieux, afin de mieux comprendre le mécanisme impliqué dans les effets anxiolytiques du BEO, l’objectif de la présente étude est d’étudier les effets du flumazénil, un antagoniste au site de liaison du BDZ, sur le comportement induit par le BEO dans le test en plein champ (OFT) chez le rat.

2. Matériaux et méthodes

2.1., Animaux

Les rats Wistar mâles (250-300 g; Charles River, Calco, Italie) ont été logés par groupes de quatre dans des cages de laboratoire standard (40 × 25 × 15 cm) à température constante (22 ± 1°C) et à humidité relative (50%) selon un horaire clair-sombre régulier (lumières de 7 h à 19 h). Avant l’expérience OFT, les rats ont eu droit à une semaine d’adaptation aux conditions de laboratoire avec un accès gratuit à la nourriture et à l’eau. La Directive du Conseil de la Communauté européenne du 24 novembre 1986 (86/609/CEE) et L. D. 4 mars 2014 No., 26 a été suivi afin de minimiser le nombre d’animaux utilisés produisant encore des résultats fiables.

2.2. Matériaux

2.3. Procédure expérimentale

L’acclimatation des rats a été réalisée pendant 2 h le jour de l’expérience. Les animaux ont été soumis à l’accoutumance. Des groupes expérimentaux aléatoires ont été formés. Les rats ont subi une administration intrapéritonéale (I. P.) de BEO (500 µL/kg) ou d’huile de jojoba . I. P. de FLZ (3 mg / kg), revenant effets BDZ dans OFT, ou son véhicule (interpolation dans une solution saline) a été administré en prétraitement 15 minutes plus tôt., Après trente minutes, les effets comportementaux ont été évalués à l’aide du test OF . Ce protocole expérimental est conforme aux données de la littérature où le prétraitement avec FLZ annule les effets comportementaux de différents produits naturels chez souvent chez les rongeurs .

le rat a été observé à partir d’un écran dans un laboratoire proche puisque le test a été enregistré avec une caméra en circuit fermé. Des tests comportementaux ont été effectués entre 09h00 et 13h00 selon les rythmes circadiens. Les enregistrements vidéo ont été soumis à l’examen suivant par un observateur aveugle (ignorant les traitements)., Une surdose d’isoflurane a été utilisée pour euthanasier l’animal après l’expérience. La salle comportementale a été ventilée et l’arène a été lavée à l’eau et nettoyée avec de l’éthanol à 70% après les séances quotidiennes pour éviter toute trace d’odeur restante de BEO et d’excréments.

2.4., Test en plein champ

le test en plein champ est considéré comme un indicateur de l’état émotionnel de l’animal, ce qui permet une évaluation facile et assez rapide de comportements bien définis, tels que la traversée, l’élevage de murs, le toilettage, le centre et l’immobilité, et il est largement utilisé dans le dépistage des médicaments qui agissent En particulier, la traversée et l’élevage de murs peuvent être considérés respectivement comme des indicateurs d’activité locomotrice et de comportement exploratoire, tandis que le toilettage, le centre et l’immobilité sont des comportements positivement corrélés à la peur ou à l’émotivité ., Le rat a été placé au centre d’une arène circulaire en plastique sombre (75 cm de diamètre) dans une pièce insonorisée avec une lumière de 20 lux . La durée de chaque séance comportementale était de 20 min. Les paramètres évalués (activité locomotrice générale dans un intervalle de 5 min (franchissements de limites carrées avec les pattes avant et l’élevage des murs), comportement lié à l’anxiété (toilettage du visage et du corps, lavage de la tête et temps passé au centre de l’arène) et immobilité) ont été filmés et analysés pour être notés (Labehaviour).

2.5., Statistics

l’analyse statistique consistait en une ANOVA unidirectionnelle ou bidirectionnelle, suivie du test de comparaisons multiples de Tukey utilisant Graph Pad® 6.0. la valeur < 0,05 a été considérée comme statistiquement significative.

3. Résultats

l’analyse Anova bidirectionnelle indique des différences entre le traitement et le temps en ce qui concerne les fréquences de franchissement et d’élevage des parois (Tableau 1). En particulier, l’administration de BEO réduit les deux comportements atteignant une signification statistique par rapport au groupe CTR (Figure 1)., L’administration systémique de FLZ, 15 min avant BEO, ne modifie pas la diminution des fréquences de croisement et d’élevage de parois mesurée chez les rats traités avec l’huile essentielle (Figure 1).

l’analyse ANOVA à Sens Unique indique également des différences dans le toilettage, le centre et le temps d’immobilité (Tableau 2). Une diminution statistiquement significative est observée pour le toilettage chez les animaux traités par BEO par rapport au groupe CTR. Le prétraitement avec FLZ n’est pas en mesure d’empêcher cet effet (Figure 2).,

en ce qui concerne la période Au milieu de l’arène, les résultats indiquent que l’administration systémique de BEO réduit ce comportement pour atteindre une signification statistique par rapport au groupe CTR (Figure 2). Le prétraitement avec FLZ n’influence pas cet effet de BEO bien qu’il soit montré une légère tendance () vers une augmentation du temps passé au centre (Figure 2).

de plus, les animaux traités avec BEO, bien que toujours vigilants, passent plus de temps dans l’immobilité que le groupe témoin (Figure 3)., Fait intéressant, chez les animaux prétraités avec FLZ, on observe une tendance à diminuer l’immobilité observée dans le groupe BEO, bien qu’aucune différence statistique ne soit calculée () (Figure 3).

pour tous les paramètres étudiés, le prétraitement avec FLZ dans le groupe témoin n’affecte pas les comportements des animaux dans les nombreuses données de la littérature à l’appui en utilisant une large plage de doses de 0,1 à 10 mg/kg .

4., Discussion

BEO, comme d’autres huiles essentielles, est largement utilisé en aromathérapie pour minimiser les symptômes d’anxiété induite par le stress bien que le mécanisme sous-jacent et son interférence sur la transmission GABAergique restent à élucider .

L’Administration de BEO exerce des effets de type anxiolytique souvent non contrecarrés de manière significative par FLZ, un antagoniste du site BDZ. Ces derniers résultats confirment que les propriétés de BEO ne sont pas parallèles à celles des BDZ ., Ici, nous avons observé que l’activité locomotrice et le comportement exploratoire, mesurés par les fréquences de croisement et d’élevage des parois, sont réduits chez les animaux traités par BEO par rapport au groupe véhicule et que le prétraitement avec FLZ n’a pas permis de prévenir les effets du phytocomplexe. De plus, au cours de la séance OFT de 20 minutes, on mesure une réduction du comportement de toilettage par BEO qui n’est pas affectée par le prétraitement avec FLZ. Dans l’ensemble, ces résultats indiquent que le récepteur BDZ n’est pas impliqué dans ces effets de BEO., Le prétraitement avec FLZ empêche partiellement les effets de BEO sur l’immobilité et le temps passé au centre de l’arène, c’est-à-dire des comportements en corrélation positive avec la peur ou l’émotivité, bien que cela n’ait pas atteint de signification statistique. Fait intéressant, ce dernier serait favorable à une implication du récepteur GABA-A dans les effets du BEO sur ces comportements. Le récepteur GABA-A contient le site isostérique du ligand endogène et plusieurs sites de liaison allostériques différents, qui modulent indirectement l’activité du récepteur et sont les cibles de divers composés synthétiques et naturels ., Les molécules ayant des structures et des affinités chimiques différentes affectent le site de liaison et présentent des effets pharmacologiques distincts. En particulier, plusieurs actions pharmacologiques peuvent être attribuées à la modulation de sous-unités alpha spécifiques . Par exemple, les propriétés sédatives et hypnotiques sont médiées par des récepteurs GABA-A contenant des sous-unités alpha-1, tandis que la modulation positive des récepteurs GABA-A aux sous-unités alpha-2 et/ou alpha-3 affiche des effets anxiolytiques .,

fait intéressant, nous avons précédemment démontré que l’administration systémique de BEO induit une libération modérée de GABA dans l’hippocampe des rats se déplaçant librement . Cette découverte neurochimique, ainsi que les effets du FLZ sur l’immobilité et le centre rapportés ici, pourraient soutenir l’hypothèse que certains des composés présents dans le phytocomplexe pourraient interférer avec la transmission médiée par le récepteur GABA-A. Plusieurs études ont étudié l’implication de cette neurotransmission dans les effets anxiolytiques de composés volatils uniques présents dans les huiles essentielles telles que le BEO., En particulier, Les auteurs suggèrent que la voie d’administration des composés pourrait moduler leur action sur le site BDZ affectant les effets anxiolytiques. Par exemple, le linalol, administré par inhalation, induit des effets anxiolytiques empêchés par FLZ, tandis que l’administration systémique ne produit pas d’effets anxiolytiques . En outre, l’administration systémique d’un mélange d’époxyde de cis et de trans (+)-limonène induit des effets anxiolytiques qui sont évités par un prétraitement avec FLZ . Cependant, lorsque le (R)-(+)-limonène est administré par inhalation, l’effet anxiolytique n’est pas bloqué par l’antagoniste du site BDZ .,

D’autres systèmes de neurotransmetteurs ont été impliqués dans les effets anxiolytiques induits par les huiles essentielles. Par exemple, les souris soumises à l’inhalation d’huile de citron présentent un effet antistress par modulation de la neurotransmission dopaminergique, sérotoninergique et GABAergique . L’Inhalation d’huile essentielle de lavande montre des effets anxiolytiques augmentant le niveau de sérotonine (5-HT) dans le cortex préfrontal, le striatum et l’hippocampe ., De plus, WAY100635, un antagoniste des récepteurs 5-HT, bloque l’action de l’huile essentielle de lavande tandis que l’utilisation d’antagonistes du récepteur GABA-A est dépourvue d’effet . Des données similaires sont également obtenues par Galdino et al. et par Tabari et al. l’OMS a observé des effets anxiolytiques après l’injection systémique D’huiles essentielles Spiranthera odoratissima et de géranium Rose neutralisées par un prétraitement avec des antagonistes des récepteurs 5-HT1A mais pas par FLZ .,

dans l’ensemble, ces données corroborent l’hypothèse selon laquelle les effets anxiolytiques des huiles essentielles et probablement du BEO peuvent être soulignés par de multiples mécanismes complexes qui méritent d’être approfondis.

5. Conclusion

Les BDZ sont des médicaments bien développés et couramment prescrits pour traiter les troubles anxieux; cependant, plusieurs effets secondaires (par exemple, léthargie, vertiges, somnolence, sédation et dépendance) peuvent être graves, de sorte que le développement de nouveaux médicaments est nécessaire., Ces effets indésirables ont provoqué la propagation de l’aromathérapie, bien que des données limitées soient disponibles sur les mécanismes sous-jacents à l’activité anxiolytique des huiles essentielles. Les résultats de notre étude contribuent à approfondir la caractérisation du profil neuropharmacologique de BEO. Ces derniers soutiennent l’hypothèse que les effets anxiolytiques de ce phytocomplexe ne sont pas superposables à ceux des BDZs et à son utilisation aromathérapeutique pour le traitement de l’anxiété induite par le stress.,

la Disponibilité des Données

Les données utilisées pour appuyer les conclusions de cette étude sont disponibles auprès de l’auteur sur demande.

les Conflits d’Intérêts

Les auteurs déclarent n’avoir aucun conflit d’intérêt concernant la publication de ce papier.

Remerciements

Les auteurs remercient Guido Fico pour habile de soutien technique. Ce travail a été soutenu par L’Université de Calabre  » ex quota 60%.”

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