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c’est avec tristesse que nous reconnaissons le décès du Dr Frederick Sanger. Sanger est connu des biologistes moléculaires et des biochimistes du monde entier pour sa technique de séquençage de l’ADN, qui lui a valu le prix Nobel de chimie de 1980.
à noter également, le laboratoire de Sanger a réalisé la première séquence complète du génome, celle d’un génome d’ADN viral de plus de 5 000 paires de bases de longueur.
le prix 1980 était le deuxième prix Nobel de Sanger, son premier décerné en 1958 pour la détermination de la structure chimique des protéines., Dans ce travail, Sanger élucidé non seulement les acides aminés qui composent l’insuline, mais aussi l’ordre dans lequel les acides aminés s’est produite.
À propos du séquençage Sanger
Le séquençage de L’ADN Sanger est également connu sous le nom de méthode de séquençage de la chaîne. La technique de Sanger utilise des didésoxynucléotides ou ddNTPs en plus des désoxynucléotides typiques (dNTPs) dans la réaction. les ddNTPs entraînent la terminaison du brin D’ADN car les ddNTPs n’ont pas le groupe 3’-OH requis pour la formation de liaisons phosphodiester entre les nucléotides. Sans cette liaison, la chaîne de nucléotides en cours de formation est terminée.,
le séquençage Sanger nécessite un ADN monocaténaire, une amorce D’ADN (radiomarquée ou avec une étiquette fluorescente), de l’ADN polymérase, des dNTPs et des ddNTPs. Quatre réactions sont mises en place, une pour chaque nucléotide, G, A, T et C. Dans chaque réaction, les quatre dNTP sont inclus, mais un seul ddNTP (ddATP, ddCTP, ddGTP ou ddTTP) est ajouté. Les réactions de séquençage sont effectuées et les produits dénaturés et séparés par taille par électrophorèse sur gel de polyacrylamide.
Ce mélange réactionnel donne différentes longueurs de fragments représentant, par exemple, l’emplacement de chacun un nucléotide dans la séquence, car bien qu’il y ait plus de dATP que de ddATP dans la réaction, il y a suffisamment de ddATP pour que chaque ATP soit finalement remplacé par un DDATP, ce qui entraîne la terminaison de la chaîne. La séparation par électrophorèse sur gel révèle la taille de ces fragments contenant du ddATP, et donc les emplacements de tous les nucléotides de la séquence. Des informations similaires sont fournies pour GTP, CTP et TTP.,
la méthode de séquençage de L’ADN Maxam et Gilbert avait l’avantage à l’époque d’être utilisée avec de l’ADN double brin. Cependant, cette méthode nécessitait la séparation des brins D’ADN ou le fractionnement des fragments d’enzymes de restriction, ce qui donnait une technique un peu plus longue que la méthode publiée en 1977 par Sanger et al.
Le Dr Sanger est né dans le Gloucestershire, au Royaume-Uni, en 1918, fils d’un médecin. Bien qu’il ait initialement prévu de suivre son père en médecine, la biochimie est devenue sa passion et son domaine de recherche., Sanger a pris sa retraite à l’âge de 65 ans, pour passer plus de temps à des passe-temps de jardinage et de navigation de plaisance.