Szorongásoldó-Mint Hatásai Bergamott illóolaj Érzéketlen Flumazenil a Patkányok

Absztrakt

a Szorongásos betegségek egyik leggyakoribb mentális zavarok, valamint a benzodiazepinek (BDZs), úgy a gamma-aminovajsav típusú (GABA-A) receptor komplex jelentenek a leggyakoribb szorongáscsökkentő gyógyszerek a világon. A krónikus BDZ-használat azonban számos mellékhatást vált ki. Állítólag az aromaterápia biztonságosabb a szorongás kezelésére., Bergamott illóolaj (BEO) kivont Citrus bergamia Risso et Poiteau gyümölcs, mint más illóolajok, széles körben használják aromaterápiás tüneteinek enyhítésére a stressz okozta szorongás. Érdekes, hogy a preklinikai adatok azt mutatják, hogy BEO indukálja a szorongásoldó-mint/izomlazító hatása az állat viselkedési feladatok nem superimposable, hogy azok a benzodiazepin diazepam. A GABAerg transzmisszió részvételének jobb tisztázása érdekében a jelen tanulmány megvizsgálja a flumazenil (FLZ), a benzodiazepin hely antagonistával történő előkezelés hatásait a Beo hatásokra, nyílt terepen végzett feladat (OFT) alkalmazásával patkányokban., A kapott adatok azt mutatják, hogy az FLZ nem befolyásolja jelentősen a fitokomplex viselkedési hatásait. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy nincs átfedés a Beo és a BDZ viselkedésbeli hatásai között, hozzájárulva az illóolaj neurobiológiai profiljának jellemzéséhez az aromaterápiában történő racionális felhasználása érdekében.

1. Bevezetés

a citrusfélék nemzetségébe tartozó gyümölcsökből kivont illóolajokat aromaterápiában használják a szorongás, az alvás, a hangulat és a kognitív rendellenességek kezelésére . Feltételezhető, hogy a bergamott a Citrus aurantium L.-ből és a Citrus limon L.-ből származik., vagy Citrus aurantifolia Swing . A bergamott illóolajat (BEO) az epicarp, részben a Citrus bergamia Risso et Poiteau friss gyümölcsének mezokarpjának hideg préselésével nyerik, az olasz Gyógyszerkönyv XII ed szerint. BEO tartalmaz egy Illékony frakció (93-96% az összes) tartalmazó oxigénezett származékok (mint például linalool) és szeszkviterpén és monoterpén szénhidrogének (mint például a limonén) és egy nem felejtő frakció (4-7%-a az összes) tartalmazó polimetoxilezett flavonok, viaszok, kumarinok, és psoralens, mint a bergamottin (5-geraniloxipsoralen) és bergapten (5-metoxipsoralen)., A limonén, γ-terpinén és β-pinén a linaloollal és a linalil-acetáttal együtt az illékony frakcióban található Leggyakoribb vegyületek közé tartozik, és együttesen alkotják a >a teljes olaj 90% – át . Az elmúlt évtizedben a preklinikai vizsgálatok támogatták a BEO terápiás alkalmazását. Különösen, bergamott olaj felruházva figyelemre méltó neurobiológiai hatások részben eredő interferencia alapvető mechanizmusok finomhangolás szinaptikus plaszticitás fiziológiai és patológiás körülmények között, azaz.,, agyi ischaemia, fájdalom, valamint a demencia viselkedési és pszichológiai tünetei . Bazális állapotban a BEO a szabadon mozgó patkányok hippokampuszában szisztémás vagy fokális adagolás után emeli a neurotranszmitter funkcióval rendelkező diszkrét aminosavak extracelluláris szintjét . Ezenkívül a Beo szisztémás dózisai növelik a riasztási, ébrenléti és relaxációs elektrokortikográfiai korrelációt ., A Beo alert és relaxációval kapcsolatos EEG-frekvencia-módosítási képessége alátámasztja az anxiolitikus-relaxáns hatásokat mutató adatokat a fitokomplex szisztémás vagy inhalációs alkalmazása után állati viselkedési feladatokban. Érdekes módon ellentmondásos eredményeket kapunk, összehasonlítva a BEO hatásait a diazepam (DZP) hatásaival. Valójában, míg Saiyudthong és Marsden úgy gondolják, hogy a phytocomplex aktív összetevői kölcsönhatásba lépnek a BDZ helyével a GABA-on-egy receptor komplex, amely szorongásoldó hatásokat vált ki, a közelmúltban bebizonyítottuk, hogy a BEO tulajdonságai nem fedik egymást a DZP hatásaival ., Mivel a GABAerg transzmisszió kulcsszerepet játszik a szorongásos rendellenességek patofiziológiájában, hogy több betekintést nyerjünk a Beo anxiolitikus – szerű hatásaival kapcsolatos mechanizmusra, a jelen tanulmány célja a flumazenil, a BDZ kötőhely antagonistája által a Beo által a patkányokon végzett nyílt terepen végzett teszt (OFT) által kiváltott viselkedésre gyakorolt hatások vizsgálata.

2. Anyagok és módszerek

2.1., Állatok

hím Wistar patkányok (250-300 g; Charles River, Calco, Olaszország) négy csoportba sorolták standard laboratóriumi ketrecekben (40 × 25 × 15 cm) állandó hőmérsékleten (22 ± 1°C) és relatív páratartalom mellett (50%), rendszeres, világos-sötét ütemterv szerint (fények reggel 7-től este 7-ig). Az OFT-kísérlet előtt a patkányoknak egy hétig engedélyezték a laboratóriumi körülményekhez való alkalmazkodást, az élelmiszerhez és a vízhez való szabad hozzáféréssel. Az Európai Tanács 1986.November 24-i irányelve (86/609/EGK) és a 2014. március 4-i ld., 26-ot követtek annak érdekében, hogy minimalizálják a még mindig megbízható eredményeket produkáló állatok számát.

2.2. Anyagok

2.3. Kísérleti eljárás

a patkányok akklimatizációját a kísérlet napján 2 órán keresztül végezték. Az állatokat szokásnak vetették alá. Véletlenszerű kísérleti csoportok alakultak ki. A patkányok intraperitoneális (i.p.) Beo (500 µL/kg) vagy jojobaolaj beadását végezték . Az FLZ I. p. – jét (3 mg / kg), a BDZ hatásainak visszafordítását az OFT-ben vagy annak járművét (sóoldatban lévő tween) 15 perccel korábban előkezelésként adták be., Harminc perc elteltével a viselkedési hatásokat Az OF teszt segítségével értékelték. Ez a kísérleti protokoll megfelel az irodalmi adatoknak, ahol az FLZ-vel végzett előkezelés visszafordítja a különböző természetes termékek viselkedési hatásait a gyakran rágcsálókban .

a patkányt egy közeli laboratóriumban egy képernyőn figyelték meg, mivel a vizsgálatot zárt áramkörű kamerával rögzítették. A cirkadián ritmusok szerint 09.00 és 13.00 között viselkedési teszteket végeztek. A videofelvételeket a következő vizsgálatnak vetették alá egy vak (nem ismeri a kezeléseket) megfigyelő., Az izoflurán túladagolását az állat eutanizálására használták a kísérlet után. A helyiséget szellőztették, az arénát vízzel mosták, és a napi üléseket követően 70% – os etanollal megtisztították, hogy elkerüljék a BEO és az ürülék maradék szagát.

2.4., Nyílt terepi teszt

a nyílt terepi teszt az állat érzelmi állapotának mutatója, amely lehetővé teszi a jól meghatározott viselkedések, például a keresztezés, a falnevelés, a ápolás, a központ és a mozdulatlanság egyszerű és meglehetősen gyors értékelését, és széles körben használják a központi idegrendszerre ható gyógyszerek (CNS) szűrésében . Különösen a keresztezés és a falnevelés tekinthető a mozgásszervi tevékenység és a feltáró viselkedés mutatóinak, míg a grooming, center, és az immobility olyan viselkedés, amely pozitívan korrelál a félelemmel vagy az érzelmességgel ., A patkányt egy sötét műanyag kör alakú Aréna (75 cm átmérőjű) közepére helyezték egy 20 lux fényű hangszigetelő szobában . Az egyes viselkedési munkamenetek időtartama 20 perc volt. A becsült paraméterek (általános mozgásszervi tevékenység szünet 5 perc (tér határa kereszteződések, mind forepaws, fal-nevelő), szorongás kapcsolatos viselkedés (arc, test ápolás, fej mosás, majd töltött idő, a középső arena), valamint a mozdulatlanság) volt videóra, majd elemzik, hogy lesz gól (Labehaviour).

2, 5., Statisztika

A statisztikai elemzés egy vagy kétirányú ANOVA-ból állt, amelyet Tukey többszörös összehasonlítási tesztje követett a Graph Pad® 6.0 használatával. a <0, 05 értéket statisztikailag szignifikánsnak tekintették.

3. Eredmények

kétirányú ANOVA analízis a kezelés és az idő közötti különbségeket mutatja a keresztezés és a falnevelés gyakoriságával kapcsolatban (1.táblázat). Különösen a Beo alkalmazása csökkenti mindkét olyan viselkedést, amely statisztikai jelentőséggel bír a CTR-csoporthoz képest (1.ábra)., A Beo előtt 15 perccel alkalmazott FLZ szisztémás alkalmazása nem módosítja az illóolajjal kezelt patkányokban mért keresztezési és faltenyésztési gyakoriságok csökkenését (1.ábra).

egyirányú ANOVA elemzés azt is jelzi, különbségek ápolás, központ, mozdulatlanság idő (2.táblázat). Statisztikailag szignifikáns csökkenés figyelhető meg a Beo-val kezelt állatoknál a CTR-csoporttal szemben. Az FLZ-vel végzett előkezelés nem képes megakadályozni ezt a hatást (2.ábra).,

az aréna közepén töltött időszak tekintetében az eredmények azt mutatják, hogy a Beo szisztémás alkalmazása csökkenti ezt a viselkedést, amely statisztikai jelentőséggel bír a CTR csoporthoz képest (2.ábra). Az FLZ-vel történő előkezelés nem befolyásolja a BEO hatását, bár enyhe tendenciát mutat () a központban töltött idő növekedése felé (2. ábra).

továbbá a BEO-val kezelt állatok, bár még mindig éberek, több időt töltenek mozdulatlanul a kontrollcsoporthoz képest (3.ábra)., Érdekes, hogy az FLZ-vel előkezelt állatokban megfigyelhető a Beo-csoportban megfigyelt mozdulatlanság csökkenésének tendenciája, bár statisztikai különbséget nem számítanak ki () (3. ábra).

az összes vizsgált paraméterre vonatkozóan az FLZ–vel történő előkezelés a kontrollcsoportban nem befolyásolja az állatok viselkedését a gyakran alátámasztó szakirodalmi adatokban, 0,1-10 mg/kg széles dózistartományban .

4., Vita

a BEO-t, mint más illóolajokat, széles körben használják az aromaterápiában a stressz okozta szorongás tüneteinek minimalizálására, bár a mögöttes mechanizmus és a GABAerg átvitelre gyakorolt interferenciája továbbra is tisztázásra kerül .

Beo adása anxiolitikus-szerű hatást fejt ki gyakran, amelyet a BDZ site antagonista nem ellensúlyoz jelentősen. Az utóbbi megállapítások megerősítik, hogy a Beo tulajdonságai nem párhuzamosak a BDZs tulajdonságaival ., Itt megfigyeltük, hogy a Beo-val kezelt állatokban a keresztezési és faltenyésztési gyakorisággal mért mozgásszervi aktivitás és feltáró viselkedés a járműcsoporthoz képest csökken, és az FLZ-vel végzett előkezelés nem akadályozta meg a fitokomplex hatását. Ezenkívül a 20 perces gyakorlás során a Beo a ápolási viselkedés csökkenését méri, amelyet az FLZ-vel történő előkezelés nem befolyásol. Összességében ezek az eredmények azt mutatják, hogy a BDZ receptor nem vesz részt a BEO ezen hatásaiban., Az FLZ-vel való előkezelés részben megakadályozza a BEO immobilitásra és az aréna közepén töltött időre gyakorolt hatását, azaz a viselkedések pozitívan korrelálnak a félelemmel vagy az érzelmességgel, bár ez nem érte el a statisztikai jelentőséget. Érdekes módon ez utóbbi támogatná a GABA-A receptor részvételét a BEO hatásaiban ezekre a viselkedésekre. A GABA-A receptor az endogén ligandum izoszterikus helyét és számos különböző alloszterikus kötőhelyet tartalmazza, amelyek közvetetten modulálják a receptor aktivitását, és különböző szintetikus és természetes vegyületek célpontjai ., A különböző kémiai szerkezetű és affinitású molekulák befolyásolják a kötőhelyet, és eltérő farmakológiai hatást fejtenek ki. Különösen számos farmakológiai hatás tulajdonítható a specifikus alfa-alegységek modulációjának . Például a nyugtató és hipnotikus tulajdonságokat az alfa-1 alegységeket tartalmazó GABA-a receptorok közvetítik, míg az alfa-2 és/vagy alfa-3 alegységekben a GABA-a receptorok pozitív modulációja anxiolitikus hatásokat mutat .,

érdekes módon korábban bebizonyítottuk, hogy a Beo szisztémás alkalmazása a GABA mérsékelt felszabadulását idézi elő a szabadon mozgó patkányok hippokampusában . Ez a neurokémiai lelet, valamint az FLZ immobilitásra és központra gyakorolt hatása alátámaszthatja azt a hipotézist, hogy a fitokomplexben jelen lévő vegyületek némelyike zavarhatja a GABA-A receptor által közvetített átvitelt. Számos tanulmány vizsgálta ennek a neurotranszmissziónak az illóolajokban, például a BEO-ban jelen lévő egyetlen illékony vegyületek anxiolitikus-szerű hatásaiban való részvételét., Különösen a szerzők azt sugallják, hogy a vegyületek beadási módja modulálhatja hatásukat a BDZ helyszínen, amely befolyásolja az anxiolitikus hatásokat. Például az inhalációval beadott linalool szorongásoldó hatásokat vált ki, amelyeket az FLZ megakadályoz, míg a szisztémás adagolás nem okoz szorongásoldó hatásokat . Továbbá a cisz és transz (+)-limonén epoxid keverékének szisztémás alkalmazása szorongásoldó hatásokat vált ki, amelyeket az FLZ-vel történő előkezelés akadályoz meg . Ha azonban az (R)-(+)-limonént inhalációval adják be, az anxiolitikus hatást a BDZ hely antagonista nem blokkolja .,

más neurotranszmitter rendszerek is szerepet játszottak az illóolajok által kiváltott anxiolitikus hatásokban. Például a citromolaj belélegzésének alávetett egerek dopaminerg, szerotonerg és GABAerg neurotranszmisszió modulációjával antistressz hatást fejtenek ki . A levendula illóolaj belélegzése szorongásoldó hatásokat mutat, amelyek növelik a szerotonin (5-HT) szintjét a prefrontális kéregben, a striatumban és a hippocampusban ., Ezenkívül a WAY100635, egy 5-HT receptor antagonista blokkolja a levendula illóolaj hatását, míg a GABA-A receptor antagonistáinak alkalmazása hatástalan . Hasonló adatokat a Galdino et al is elért. és Tabari et al. akik a Spiranthera odoratissima és a Rose geranium illóolajok szisztémás injekciója után szorongásoldó hatásokat figyeltek meg, amelyeket az 5-HT1A receptor antagonistákkal történő előkezelés ellensúlyozott, de nem az FLZ.,

Összességében ezek az adatok alátámasztják azt a hipotézist, hogy az illóolajok és a BEO valószínűleg szorongásoldó hatású hatásait több összetett mechanizmus is aláhúzhatja, amelyek további vizsgálatot érdemelnek.

5. Következtetés

a BDZ-k jól fejlett és általánosan előírt gyógyszerek, amelyeket szorongásos zavarok kezelésére alkalmaznak; azonban számos mellékhatás (pl. letargia, szédülés, álmosság, szedáció és függőség) súlyos lehet, ezért új gyógyszerek kifejlesztésére van szükség., Ezek a mellékhatások az aromaterápia elterjedését váltották ki, bár korlátozott adatok állnak rendelkezésre az illóolajok anxiolitikus aktivitásának alapjául szolgáló mechanizmusokról. Tanulmányunk eredményei hozzájárulnak a BEO neurofarmakológiai profiljának jellemzéséhez. Ez utóbbi alátámasztja azt a hipotézist, hogy ennek a fitokomplexnek az anxiolitikus hatása nem alkalmazható a BDZs-kre, valamint annak aromaterápiás alkalmazására a stressz által kiváltott szorongás kezelésére.,

rendelkezésre álló adatok

a tanulmány megállapításainak alátámasztására használt adatok kérésre a megfelelő szerzőtől érhetők el.

összeférhetetlenség

a szerzők kijelentik, hogy nincs összeférhetetlenség a cikk közzétételével kapcsolatban.

A szerzők köszönetet mondanak Guido Ficónak az ügyes technikai támogatásért. Ezt a munkát támogatta a University of Calabria ” ex kvóta 60%.”

---