Mannitolo Sale Agar per l’isolamento di Staphylococcus aureus

Mannitolo Sale Agar (MSA) è usato come mezzo selettivo e differenziale per l’isolamento e l’identificazione di Staphylococcus aureus da campioni clinici e non clinici. Incoraggia la crescita di un gruppo di determinati batteri mentre inibisce la crescita di altri. È un mezzo selettivo preparato secondo le raccomandazioni di Chapman per l’isolamento di stafilococchi patogeni presuntivi.,

Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)

Ingredients	Gms / Litre
Pancreatic Digest of Casein	5.0 gm
Peptic Digest of Animal Tissue	5.0 gm
Beef Extract	1.,0 gm
Sodium Chloride	75.0 gm
D-Mannitol	10.0 gm
Phenol Red	0.025 gm
Agar	15.0 gm
Total	111. 025 gm

Distilled Water = 1000 ml

Final pH 7.4 ± 0.,2 a 25°C.

Principio di mannitolo Sale Agar

Mannitolo Sale Agar contiene peptoni e estratto di manzo, che forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. La concentrazione del 7,5% di cloruro di sodio provoca l’inibizione parziale o completa di organismi batterici diversi dagli stafilococchi. Il cloruro di sodio fornisce anche elettroliti essenziali per il trasporto e l’equilibrio osmotico. Il mannitolo è il carboidrato fermentabile, la cui fermentazione porta alla produzione di acido, rilevata dall’indicatore rosso fenolo, aiuta nella differenziazione delle specie stafilococciche., Gli stafilococchi coagulasi positivi (ad esempio, Staphylococcus aureus) producono colonie gialle e un mezzo giallo circostante mentre gli stafilococchi coagulasi negativi producono colonie rosse e nessun cambiamento di colore dell’indicatore rosso fenolo. L’agar è l’agente solidificante.

L’aggiunta del 5% di emulsione di tuorlo d’uovo v / v consente di rilevare l’attività lipasica degli stafilococchi insieme alla fermentazione del mannitolo. Il sale cancella l’emulsione di tuorlo d’uovo e la produzione di lipasi viene rilevata come zona opaca gialla intorno alle colonie.,

Usi dell’agar del sale del mannitolo

1. È usato per l’isolamento selettivo e la differenziazione di Staphylococcus aureus dai campioni clinici.
2. È anche usato per l’enumerazione di stafilococchi in alimenti e latticini.
3. Questo mezzo è incluso anche nel Manuale analitico batteriologico per i test cosmetici.
4. Inoltre è utilizzato nell’esame batteriologico dell’acqua della piscina, delle stazioni termali e dell’acqua potabile facendo uso di filtrazione a membrana

Preparazione dell’agar del sale del mannitolo

1. Sospenda 111.,025 g di MRS media in 1000 ml di acqua distillata.
2. Far bollire per sciogliere completamente il supporto.
3. Autoclave a 121°C per 15-20 minuti.

(Opzionale: aggiungere 5% v/v Emulsione tuorlo d’uovo)

1. Raffreddare a 45-50°C e versare in piastre di petri.,

Result Interpretation on Mannitol Salt Agar

Organisms	Results
Staphylococcus aureus	Yellow colonies with yellow zones.
Staphylococci other than S. aureus (e.g. Staphylococcus epidermidis )	Colorless or Red colonies with red zones.,
Streptococci	No growth to trace growth.
Micrococci	Large white to orange.
Gram-negative bacteria	No growth to trace growth.,

Controllo di qualità sull’agar del sale del mannitolo

Controllo positivo: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Colonie gialle di medie dimensioni

Controllo negativo: Escherichia coli ATCC 25922, inibizione da parziale a completa.

Limitazioni del mannitolo Salt Agar

1. Diverse specie di stafilococco diverse da aureus sono positive al mannitolo e producono colonie gialle circondate da zone gialle su questo terreno (ad esempio S. capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans e altre specie)., Pertanto, ulteriori test biochimici sono necessari per l’identificazione di S. aureus o di altre specie.
2. La maggior parte degli organismi diversi dagli stafilococchi sono inibiti dall’alta concentrazione di sale trovata nell’agar di sale di mannitolo, ad eccezione di alcuni organismi marini alofilli.
3. Alcuni ceppi di Staphylococcus aureus possono presentare una fermentazione ritardata di mannitolo. Le piastre negative devono essere nuovamente incubate durante la notte prima di scartare.
4. Il presunto Staphylococcus aureus deve essere confermato con un test della coagulasi.

1. Mannitolo Sale Agar. HiMedia.,
2. Mannitol Salt Agar (MSA) (Chapman Medium) European Pharmacopoeia, Usp.
3. Mannitol Salt Agar. Accumix.
4. Mannitol Salt Agar. Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France.
5. Mannitol Salt Agar. Remel.
6. Mannitol Salt Agar. PML Microbiologicals, Inc.
7. Mannitol Salt Agar. Acumedia Manufacturers, Inc.
8. Mannitol Salt Agar. Difco™ & BBL™ Manual, 2nd Edition
9. Mannitol Salt Agar. Liofilchem SRL.
10. BD Mannitol Salt Agar. Becton Dickinson GmbH.,
11. Mannitolo Sale Agar (MSA). Diagnostica Hardy.
12. Mannitolo Sale Agar. Terreni di coltura disidratati. Thermo Fisher Scientific Inc.

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