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フレデリック-サンガー博士の逝去を認識するのは悲しいことです。 サンガーは、彼のために1980年のノーベル化学賞を受賞した彼のDNA配列決定技術のために世界中の分子生物学者や生化学者に知られています。

また、注目すべきは、サンガーの研究室では、長さが5,000以上の塩基対のウイルスDNAゲノムの最初の完全なゲノム配列を達成しました。

1980年の賞は、サンガーの第二のノーベル賞であり、1958年にタンパク質の化学構造を決定するために最初に授与されました。, この研究では、サンガーは、インスリンを構成するアミノ酸だけでなく、アミノ酸が発生する順序も明らかにした。

サンガー配列決定について
サンガー DNA配列決定は、配列決定の鎖終結法としても知られています。 サンガー法は、反応において典型的なデオキシヌクレオチド(dntp)に加えて、ジデオキシヌクレオチドまたはddNTPsを使用する。 ddNTPsは、ヌクレオチド間のホスホジエステル結合形成に必要な3′-OH基を欠いているため、DNA鎖の終了をもたらす。 この結合がなければ、形成されているヌクレオチドの鎖は終端される。,

サンガーシーケンシングは、一本鎖DNA、DNAプライマー(放射性標識または蛍光タグのいずれか)、DNAポリメラーゼ、dntpおよびddNTPsを必要とする。 それぞれの反応には四つのdntpがすべて含まれるが、一つのddNTP(ddATP、ddCTP、ddGTPまたはddTTP)のみが添加される。 シーケンシング反応を行い,ポリアクリルアミドゲル電気泳動を用いて生成物を変性させ,サイズによって分離した。

サンガージデオキシシーケンシングの図。, (Courtesy of Wikipedia and Estevez,J.)

この反応ミックスは、例えば、配列中の各ヌクレオチドの位置を表す様々な長さの断片をもたらし、反応中にddATPよりもdATPが多いが、各ATPが最終的にddATPに置き換えられ、連鎖終結をもたらすので、各ATPがddATPに置き換えられるのに十分なddATPがあるからである。 ゲル電気泳動による分離は、これらのddatp含有断片の大きさ、したがって配列中のすべてのヌクレオチドの位置を明らかにする。 GTP、CTPおよびTTPについても同様の情報が提供されています。,

MaxamおよびGilbert DNA配列決定法は、二本鎖DNAと共に使用される際の利点を有していた。 しかしながら、この方法は、制限酵素断片のDNA鎖分離または分画を必要とし、その結果、Sangerらによって出版された1977年の方法と比較して、幾分時間のかか

サンガー博士は、1918年にイギリスのグロスターシャーで医師の息子として生まれました。 彼は当初、医学に彼の父に従うことを計画していたが、生化学は彼の生涯の情熱と研究の努力の分野になった。, サンガーはガーデニングやボートの趣味でより多くの時間を過ごすために、65歳で引退した。


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