Promega Connections (한국어)
Frederick Sanger 박사의 통과를 인식하는 것은 슬픔과 함께합니다. Sanger 는 1980 년 노벨 화학상을 수상한 DNA 시퀀싱 기술로 전 세계적으로 분자 생물 학자와 생화학 자에게 알려져 있습니다.
또한 주목할만한 Sanger 의 실험실은 길이가 5,000 개 이상의 염기쌍 인 바이러스 DNA 게놈의 첫 번째 완전한 게놈 서열을 달성했습니다.
1980 년상은 Sanger 의 두 번째 노벨상으로 1958 년 단백질의 화학 구조를 결정하기 위해 처음으로 수상했습니다., 이 작품에서 생어는 인슐린을 구성하는 아미노산뿐만 아니라 아미노산이 발생한 순서를 밝혀 냈습니다.
Sanger Sequencing 소개
Sanger DNA sequencing 은 시퀀싱의 사슬 종단 방법으로도 알려져 있습니다. Sanger 기술은 반응에서 전형적인 deoxynucleotides(dNTPs)이외에 dideoxynucleotides 또는 ddNTPs 를 사용합니다. ddNTPs 는 뉴클레오티드 사이의 포스 포 디에 스터 결합 형성에 필요한 3′-OH 그룹이 부족하기 때문에 ddNTPs 는 DNA 가닥의 종결을 초래한다. 이 결합이 없으면 형성되는 뉴클레오타이드의 사슬이 종결된다.,
생어 시퀀싱하는 단일 가닥 DNA,DNA 프라이머(중 하나 또는 방사선된 형광 tag),DNA polymerase,dNTPs 및 ddNTPs. 네 반응은 설정,하나를 위해 각각의 뉴클레오티드,G,A,T,C 에서 각각 반응 네 dNTPs 포함되어 있지만,하나의 ddNTP(ddATP,ddCTP,ddGTP 또는 ddTTP)가 추가됩니다. 시퀀싱 반응을 수행하고 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동을 사용하여 생성물을 크기별로 변성 및 분리합니다.
이 혼합 반응 결과를 다양한 길이의 조각을 나타내는,예를 들어,위의 각각의 뉴클레오티드에서 순서이기 때문에,하는 동안 더 많은 dATP 보다 ddATP 에서 반응,충분한 ddATP 는 각 ATP 궁극적으로 대신으로 대체 ddATP 결과,체인 종료됩니다. 겔 전기 영동에 의한 분리는 이들 ddATP 함유 단편의 크기,따라서 서열 내의 모든 뉴클레오타이드의 위치를 보여준다. 유사한 정보가 GTP,CTP 및 TTP 에 제공됩니다.,
Maxam 및 Gilbert DNA 시퀀싱 방법은 이중 가닥 DNA 와 함께 사용될 때 이점이 있었다. 그러나 이 방법은 필요한 DNA 분리 또는 분류의 제한 효소 조각의 결과로,다소 시간이 소요되는 기술과 비교하여 1977 년 방법에 의해 출판 생어 et al.
Sanger 박사는 1918 년 영국 글로스터 셔(Gloucestershire)에서 의사의 아들로 태어났습니다. 그는 처음에는 아버지를 의학으로 따라갈 계획이었지만 생화학은 평생 동안 열정과 연구 노력의 영역이되었습니다., 생어는 정원 가꾸기와 보트 타기의 취미에 더 많은 시간을 할애하기 위해 65 세에 은퇴했습니다.