Mannitol Salt Agar for isolasjon av Staphylococcus aureus

Mannitol Salt Agar (MSA) er brukt som en selektiv og differensiert medium for isolering og identifisering av Staphylococcus aureus fra kliniske og ikke-kliniske prøver. Det stimulerer veksten av en gruppe av visse bakterier mens hemme veksten av andre. Det er et selektivt medium utarbeidet i henhold til anbefalinger fra Chapman for isolasjon av presumptive patogene stafylokokker.,

Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)

Ingredients	Gms / Litre
Pancreatic Digest of Casein	5.0 gm
Peptic Digest of Animal Tissue	5.0 gm
Beef Extract	1.,0 gm
Sodium Chloride	75.0 gm
D-Mannitol	10.0 gm
Phenol Red	0.025 gm
Agar	15.0 gm
Total	111. 025 gm

Distilled Water = 1000 ml

Final pH 7.4 ± 0.,2 på 25°C.

Prinsippet om Mannitol Salt Agar

Mannitol Salt Agar inneholder peptones og biff ekstrakt, som leverer nitrogen, vitaminer, mineraler og aminosyrer viktig for vekst. De 7,5% konsentrasjon av natriumklorid resultater i delvis eller fullstendig hemming av bakterielle organismer annet enn stafylokokker. Natriumklorid leverer også viktige elektrolytter for transport og osmotisk balanse. Mannitol er gjæringsdyktig karbohydrater, gjæring som fører til syre produksjon, oppdaget av fenol røde indikatoren, aids i differensiering av stafylokokk arter., Coagulase-positive stafylokokker (f.eks., Staphylococcus aureus) produserer gule kolonier og en omkringliggende gul medium mens coagulase-negative stafylokokker produsere røde kolonier og ingen fargeendring av fenol røde indikatoren. Agar er solidifying agent.

Tillegg av 5% v/v Eggeplomme Emulsjon muliggjør påvisning av lipase aktivitet av stafylokokker sammen med mannitol gjæring. Salt tømmer eggeplomme emulsjon og lipase produksjon er registrert som gul ugjennomsiktig sone rundt koloniene.,

Bruker av Mannitol Salt Agar

1. Det er brukt for selektiv isolasjon og differensiering av Staphylococcus aureus fra kliniske prøver.
2. Det er også brukt til opplisting av stafylokokker i mat og meieriprodukter.
3. Dette mediet er også inkludert i Bakteriologisk Analytisk Manual for kosmetikk testing.
4. Det er også brukt i bakteriologisk undersøkelse av svømmebasseng, vann, spa og drikkevann ved hjelp av membran filtrering

Utarbeidelse av Mannitol Salt Agar

1. Suspender 111.,025 gm MRS media i 1000 ml destillert vann.
2. Kok å oppløse media fullstendig.
3. Autoklaveres ved 121°C i 15-20 minutter.

(Valgfritt: Legg til 5% v/v Eggeplomme Emulsjon)

1. Kult å 45-50°C og hell i petri retter.,

Result Interpretation on Mannitol Salt Agar

Organisms	Results
Staphylococcus aureus	Yellow colonies with yellow zones.
Staphylococci other than S. aureus (e.g. Staphylococcus epidermidis )	Colorless or Red colonies with red zones.,
Streptococci	No growth to trace growth.
Micrococci	Large white to orange.
Gram-negative bacteria	No growth to trace growth.,

kvalitetskontroll på Mannitol Salt Agar

Positiv Kontroll: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Mellomstore gule kolonier

Negativ Kontroll: Escherichia coli ATCC 25922, Delvis til Fullstendig Hemming.

Begrensninger av Mannitol Salt Agar

1. Flere Staphylococcus andre arter enn aureus er mannitol positive og produsere gule kolonier omgitt av gule soner på dette mediet (f.eks. S. capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans, og andre arter)., Derfor videre biokjemiske tester er nødvendig for identifikasjon av S. aureus eller andre arter.
2. de Fleste andre organismer enn stafylokokker er hemmet av den høye salt konsentrasjon finnes i Mannitol Salt Agar bortsett fra noen halophillic marine organismer.
3. Et par stammer av Staphylococcus aureus, kan gi en forsinket gjæring av mannitol. Negative platene bør være re-inkubert over natten før de kastes.
4. Presumptive Staphylococcus aureus må være bekreftet med en coagulase-test.

1. Mannitol Salt Agar. HiMedia.,
2. Mannitol Salt Agar (MSA) (Chapman Medium) European Pharmacopoeia, Usp.
3. Mannitol Salt Agar. Accumix.
4. Mannitol Salt Agar. Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France.
5. Mannitol Salt Agar. Remel.
6. Mannitol Salt Agar. PML Microbiologicals, Inc.
7. Mannitol Salt Agar. Acumedia Manufacturers, Inc.
8. Mannitol Salt Agar. Difco™ & BBL™ Manual, 2nd Edition
9. Mannitol Salt Agar. Liofilchem SRL.
10. BD Mannitol Salt Agar. Becton Dickinson GmbH.,
11. Mannitol Salt Agar (MSA). Hardy-Diagnostikk.
12. Mannitol Salt Agar. Dehydrert Kultur Media. Thermo Fisher Scientific Inc.

---