Promega Tilkoblinger
Det er med tristhet at vi gjenkjenner bestått av Dr. Frederick Sanger. Sanger er kjent for å molekylær biologi og biochemists over hele verden for sin DNA-sekvensering teknikk, som vant for ham 1980 nobelprisen i Kjemi.
Også verdt å merke seg, Sanger laboratorium oppnådd den første komplette genome sequence, som på en viral DNA-genom mer enn 5000 base-par i lengden.
1980-premien var Sanger andre Nobel-prisen, hans utdelt for første gang i 1958 for å bestemme den kjemiske strukturen til proteiner., I dette arbeidet, Sanger belyst ikke bare aminosyrer som består insulin, men også i hvilken rekkefølge aminosyrer oppstått.
Om Sanger-Sekvensering
Sanger DNA-sekvensering er også kjent som kjede-oppsigelse metode for sekvensering. Det Sanger teknikken bruker dideoxynucleotides eller ddNTPs i tillegg til de vanlige deoxynucleotides (dntp) i reaksjonen. ddNTPs resultere i oppsigelse av DNA-strand fordi ddNTPs mangler 3′-OH-gruppe som kreves for phosphodiester bond dannelse mellom nukleotider. Uten dette obligasjonslånet kjede av nukleotider blir dannet er avsluttet.,
Sanger-sekvensering krever en single-strandet DNA, DNA-primer (enten radiolabeled eller med en fluorescerende tag), DNA-polymerase, dntp og ddNTPs. Fire reaksjoner er satt opp, en for hvert nukleotid, G, A, T og C. I hver reaksjon på alle fire dntp-er inkludert, men bare én ddNTP (ddATP, ddCTP, ddGTP eller ddTTP) er lagt til. Den sekvensering reaksjoner utføres og produkter denaturert og atskilt med størrelse ved hjelp av polyakrylamid gel elektroforese.
Dette reaksjonsblanding resultater i ulike lengder av fragmenter som representerer, for eksempel plasseringen av hver En nukleotid i den rekkefølgen, fordi mens det er mer dATP enn ddATP i reaksjonen, det er nok ddATP at hver ATP til slutt i stedet erstattet med et ddATP, noe som resulterer i kjeden oppsigelse. Separasjon ved gel elektroforese avslører størrelsen på disse ddATP-som inneholder fragmenter, og dermed plasseringen av alle En nukleotid i den rekkefølgen. Tilsvarende informasjon er tilgjengelig for GTP, CTP og TTP.,
Maxam og Gilbert DNA-sekvensering metoden hadde fordelen ved tiden for å bli brukt med dobbel-strandet DNA. Men, denne metoden kreves DNA-strand separasjon eller fractionation av restriction enzym fragmenter, noe som resulterer i en litt mer tidkrevende teknikk, i forhold til 1977-metoden publisert av Sanger et al.
Dr. Sanger ble født i Gloucestershire, U.K. i 1918, sønn av en lege. Selv om han i utgangspunktet planlagt til å følge sin far til medisin, biokjemi ble hans livslange lidenskap og område for forskning bestrebelse., Sanger pensjonert ved fylte 65 år, for å bruke mer tid på hobbyer hagearbeid og båtliv.