Agar Salgado de manitol para o isolamento de Staphylococcus aureus
Mannitol Agar Salgado (MSA) é utilizado como meio selectivo e diferencial para o isolamento e identificação de Staphylococcus aureus a partir de espécimes clínicos e não clínicos. Encoraja o crescimento de um grupo de certas bactérias enquanto inibe o crescimento de outras. É um meio seletivo preparado de acordo com as recomendações de Chapman para o isolamento de estafilococos patogénicos presumíveis.,
Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)
Ingredients |
Gms / Litre |
| Pancreatic Digest of Casein | 5.0 gm |
| Peptic Digest of Animal Tissue | 5.0 gm |
| Beef Extract | 1.,0 gm |
| Sodium Chloride | 75.0 gm |
| D-Mannitol | 10.0 gm |
| Phenol Red | 0.025 gm |
| Agar | 15.0 gm |
| Total | 111. 025 gm |
Distilled Water = 1000 ml
Final pH 7.4 ± 0.,O Ágar Salgado de manitol contém peptonas e extrato de carne, que fornecem azoto, vitaminas, minerais e aminoácidos essenciais para o crescimento. A concentração de 7, 5% de cloreto de sódio resulta na inibição parcial ou completa de organismos bacterianos que não staphylococci. O cloreto de sódio também fornece eletrólitos essenciais para o transporte e equilíbrio osmótico. O manitol é o hidrato de carbono Fermentável cuja fermentação conduz à produção de ácido, detectado pelo indicador vermelho de fenol, ajuda na diferenciação das espécies estafilocócicas., Os estafilococos Coagulase positivos (por exemplo, Staphylococcus aureus) produzem colónias amarelas e um meio amarelo circundante, enquanto os estafilococos coagulase negativos produzem colónias vermelhas e não há alteração de cor do indicador vermelho de fenol. Agar é o agente solidificador.a adição de 5% v/v de emulsão de gema de ovo permite a detecção da actividade lipase dos estafilococos juntamente com a fermentação de manitol. O sal limpa a emulsão de gema de ovo e a produção de lipase é detectada como zona amarela opaca em torno das Colónias.,é utilizado para o isolamento selectivo e diferenciação de Staphylococcus aureus a partir de amostras clínicas.é também utilizado para a enumeração de estafilococos em alimentos e produtos lácteos.este meio também está incluído no Manual analítico bacteriológico para testes de cosméticos.é também utilizado no exame bacteriológico da água da piscina, das Espas e da água de beber, através de filtração por membrana preparação de ágar Salgado de manitol suspensão 111.,025 gm de MRS media Em 1000 ml de água destilada.ferva para dissolver completamente o meio.Autoclave a 121°C durante 15-20 minutos.
(opcional: adicionar 5% v/v emulsão de gema de ovo)
- arrefecer a 45-50°C e verter em placas de petri.,
Result Interpretation on Mannitol Salt Agar
Organisms |
Results |
| Staphylococcus aureus | Yellow colonies with yellow zones. |
| Staphylococci other than S. aureus (e.g. Staphylococcus epidermidis ) | Colorless or Red colonies with red zones., |
| Streptococci | No growth to trace growth. |
| Micrococci | Large white to orange. |
| Gram-negative bacteria | No growth to trace growth., |
o Controle de Qualidade Mannitol Salt Agar
Controlo Positivo: Staphylococcus aureus ATCC 6538, de tamanho Médio colónias amarelas
Controlo Negativo: Escherichia coli ATCC 25922, Inibição Parcial a Completa.várias espécies de Staphylococcus além do aureus são manitol positivas e produzem colónias amarelas rodeadas por zonas amarelas neste meio (por exemplo, S. capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans e outras espécies)., Por conseguinte, são necessários outros testes bioquímicos para a identificação de S. aureus ou de outras espécies.a maioria dos organismos para além dos estafilococos são inibidos pela elevada concentração de sal encontrada no Ágar Salgado de manitol, excepto em alguns organismos marinhos halofílicos.algumas estirpes de Staphylococcus aureus podem apresentar uma fermentação tardia do manitol. As placas negativas devem voltar a ser incubadas durante a noite antes de serem descartadas.Staphylococcus aureus presumível deve ser confirmado com um teste de coagulase.ágar Salgado de manitol. HiMedia.,