Dolly la 20: Povestea din interior pe lume cel mai faimos oi

0 Comments

Jeff J. Mitchell/Reuters

Dolly, primul mamifer clonat dintr-o celulă adultă, s-a născut la 5 iulie 1996. Dar ea a fost creată cu cinci luni mai devreme, într-o cameră mică la Institutul Roslin, în afara Edinburgh, Marea Britanie.Karen Walker, embriolog, ppl Therapeutics: în ziua în care am făcut Dolly, am avut o zi atât de proastă.,Bill Ritchie, embriolog, Institutul Roslin: era 8 februarie 1996. M-am uitat în sus. Știm că a fost o zi de gunoi: am avut diverse probleme cu infecții și lucruri.Walker: este păcat că clădirea a fost demolată, altfel ai putea vedea camera în care a fost făcută Dolly. Eu folosesc cuvântul” cameră ” vag, pentru că într-adevăr a fost doar un dulap mare, care, atunci când Bill și am fost acolo, ai putea obține doar două scaune și incubator în.

Ritchie: a fost literalmente dulap. Era dulapul de la capătul laboratorului., Când am primit echipajele de filmare mai târziu, nu le-a venit să creadă, nu era loc pentru a filma.reporter Ewen Callaway se uită înapoi la Dolly the sheep ‘ s legacy, la 20 de ani de la nașterea ei

este posibil să aveți nevoie de un browser mai recent sau pentru a instala cea mai recentă versiune a pluginului Adobe Flash.Walker și Ritchie au făcut parte dintr-un proiect al Institutului Roslin și spin-off ppl Therapeutics, cu scopul de a face modificări genetice precise animalelor de fermă., Echipa științifică, condusă de embriologul Roslin Ian Wilmut, a motivat că cel mai bun mod de a face aceste schimbări ar fi să tweak genomul unei celule în cultură și apoi să transfere nucleul într-o celulă nouă.Ritchie: modul simplu de a descrie transferul nuclear este că luați un ovocit, un ou nefertilizat și eliminați cromozomii. Apoi luați o celulă completă care conține atât cromozomi masculi, cât și feminini — toate celulele noastre fac, în afară de gonade., Iei acea celulă și o fuzionezi cu oul enucleat, o activezi — care începe să crească-și o transferi unei mame surogat. Sperăm că, cu degetele încrucișate, veți obține un pui clonat, o copie a animalului de la care ați luat acea celulă.Walker: plictisitor este absolut cuvântul. Stai, te uiți la microscop și ai ambele mâini pe micromanipulatoare. Este un fel de joystick-uri pe care copiii le folosesc în zilele noastre la jocuri. Dacă ți-a alunecat cotul, ai putea șterge toată farfuria.,cu un an mai devreme, echipa a produs oi gemene, numite Megan și Morag, prin clonarea celulelor embrionare cultivate într-un efort condus de biologul de dezvoltare Roslin Keith Campbell. Dar în această zi din februarie 1996, problemele cu liniile celulare fetale pe care intenționau să le folosească au însemnat că vor avea nevoie de un alt donator nuclear.Walker: memoria mea este de a da din aripi ca un pui, gândire ,” ce vom pune în?”pentru că celulele pe care urma să le folosim nu sunt acolo. Ultimul lucru pe care vrei să-l faci este să irosești ovocitele pe care le ai. Am vrut să încercăm ceva, cel puțin.,Angela Scott, tehnician în cultura celulară, PPL: am primit vești de la Karen pentru a spune că celulele pe care le așteptau au fost contaminate. M-au întrebat dacă am celule pe care le-ar putea folosi. Celulele pe care le aveam erau celule epiteliale mamare ovine: căutam să creștem expresia proteinelor din lapte. Acestea erau celule adulte.Alan Colman, director de cercetare, PPL: am venit dintr-un fond de transfer nuclear cu John Gurdon . Nu a reușit niciodată să obțină o broască adultă folosind transferul nuclear de la un donator de celule adulte., A reușit să obțină mormoloci folosind celule adulte, dar nu a reușit niciodată să obțină o broască adultă. Nu credeam că va funcționa deloc cu celulele adulte. Dar nu aveam altă linie celulară cu care să mergem, așa că am fost cu toții de acord să folosim aceste celule ale glandelor mamare și să vedem ce s-a întâmplat, să câștigăm ceva experiență. Acestea erau de la o oaie de 6 ani-de vârstă mijlocie pentru o oaie.Ian Wilmut, embriolog, Roslin: acest lucru este greșit până în prezent. Dolly este descris ca primul mamifer clonat dintr-o celulă adultă. Ea e de fapt prima clonă pentru adulți, punct. Ea este de multe ori undersold.,deși vacile clonate și transgenice ar fi mai valoroase pentru industrie, echipa Roslin a lucrat cu oi din motive practice.Wilmut: bovinele sunt incredibil de scumpe și au un interval lung de generație. Oile sunt mult mai puțin costisitoare și mult mai ușor de lucrat. Și cunoșteam Biologia reproducerii. Era foarte probabil ca dacă am putea face ceva să funcționeze la oi, ar funcționa la vaci. Oile sunt vaci mici, ieftine.John Bracken, asistent de cercetare la fermă, Roslin: ar fi 40-60 de animale care trec prin intervenții chirurgicale în fiecare săptămână în timpul sezonului de reproducere., Este o mulțime de oi diferite în sistem, și care a trebuit să fie foarte precis monitorizate astfel încât animalele au fost la locul potrivit la momentul potrivit.Walker: Bill obișnuia să țină embrionii și ovocitele — când îi aducea înapoi de la fermă — în buzunarul de sus al cămășii. Nu am avut un buzunar de top tricou, așa că am folosit pentru a le băga în sutienul meu. A fost o modalitate de a le menține cald și le aduce înapoi în laborator și să le într-un mediu controlat adecvat. Nu cred că în interiorul sutienul meu a fost teribil de controlat, dar nici nu a fost Bill”s top shirt buzunar.,Ritchie: în ziua în care am făcut-o pe Dolly, eu aș fi făcut enuclearea, iar ea ar fi făcut fuziunea. Acesta a fost modul nostru normal de a face lucrurile.Walker: am făcut fuziunea în ziua în care am făcut-o pe Dolly. Bill și cu mine glumim, că el e mama și eu sunt tatăl pentru că, în esență, am fost Mimica a ceea ce ar face sperma.videoclipul naturii întâlnește doi dintre embriologii care au creat cele mai faimoase oi din lume.,

au transferat 277 de nuclee din linia celulelor mamare — dintr-o rasă cu fața albă cunoscută sub numele de Finn Dorset — în ouă din rasa hardy Scottish blackface. Doar 29 dintre embrionii rezultați au fost implantați în oi surogat. Așteptările erau scăzute: părea aproape imposibil ca un nucleu de celule adulte să poată fi reprogramat pentru a da naștere unui animal viu. Majoritatea embrionilor clonați au avortat, mulți chiar înainte de sarcină ar putea fi determinați cu ultrasunete.Wilmut: sezonul de creștere a oilor începe în octombrie și se termină în februarie, martie-ish., Până la Crăciun, am stabilit sarcini după transferul din celulele fetale, așa că mergea bine. Dacă nu am fi făcut asta, probabil că nu ne-am fi jucat să lucrăm cu ceea ce a devenit Dolly, celulele mamare.Angelika Schnieke, biolog molecular, PPL: îmi amintesc că l-am întâlnit pe Ian Wilmut la cantină și era foarte sceptic. El a spus:”Aș fi surprins dacă funcționează, dar PPL plătește pentru experimente, așa că le facem.”

Bracken: am scanat toți destinatarii care au transferat embrioni și am știut că sunt oi importante., În fiecare zi în care oamenii de știință știau că scanăm, ar fi foarte dornici să știe dacă există sarcini.Walker: nu m-am dus să văd toate scanările. Dar cu Dolly-pentru că știam că acestea erau celule Bill și am pus în – am plecat în jos în acea zi special cu John.Bracken: am fost foarte mulțumit că a fost o sarcină. Nu mi-am dat seama de importanța reală pentru că nu ni s-a spus cu adevărat. Știam că e o sarcină importantă. Nu avea aceeași greutate. Nu ne gândeam, ” Uau!, Dacă acest lucru progresează la un miel viu, acesta va fi un bătăuș mondial, sau va transforma înțelegerea științifică pe capul său.”

Walker: am luat un videoclip gol cu mine, ca să-i pot arăta colegilor mei. Acel videoclip stă în apartamentul meu și, spre rușinea mea, nu l-am transferat niciodată pe DVD. Ar trebui.

Schnieke: îmi amintesc ziua în care am avut prima scanare. Mereu am întrebat. Și apoi am văzut imaginea și scanările. Atunci trebuie doar să speri că durează și merge până la capăt.,

Wilmut: memoria mea este că se uitau în jurul Zilei 30 sau 35, deci mai sunt încă 120 de zile, în care suspini cu ușurare și speranță.

Reuters

Ian Wilmut cu Dolly expuse la Muzeul Național din Scoția.doar câțiva dintre membrii echipei au fost martorii nașterii ei.

Bracken: sa întâmplat în jurul orei 4: 30 după-amiaza. De îndată ce a intrat în travaliu, am chemat veterinarul Dick pentru a obține unul dintre veterinarii lor să iasă., Chiar dacă Douglas McGavin și cu mine, probabil, a avut 50 de ani de experiență între noi, pur și simplu ar fi fost nemaiauzit dacă ne-am decis Noi d asista nașterea și ceva a mers prost.

Ritchie: știam că Dolly era pe cale să se nască și cred că dădea semne că se apropie de miel, și iată că am trecut prin și s-au născut bucăți de Dolly. Era un veterinar acolo, așa că s-a asigurat că animalul e bine și a scos mielul.

Bracken: era absolut normal. Nici un fel de complicații. Era un miel foarte viabil., S-a pus pe picioare foarte repede, probabil în prima jumătate de oră, ceea ce este un indiciu foarte bun că lucrurile sunt normale.Ritchie: cred că am sărit în sus și în jos când am văzut acea față albă.Scott: Karen era plecată la o nuntă la acea vreme.Walker: I-am dat numărul de fax al hotelului. Aș fi vrut să fi păstrat faxul. Acesta a spus: „are o față albă și picioare de blană.Scott: nu știu ce trebuie să fi crezut la hotel: „Wow, asta e un copil cu adevărat neobișnuit.”

Wilmut: am fost în alocare. Am avut un telefon să spun că avem un miel viu., Am emis o instrucțiune că nimeni nu ar trebui să fie acolo care nu trebuie să fie acolo. Mulți erau curioși. Mi-am respectat propria regulă pentru că nu am nimic de contribuit.

Bracken: stau lângă Douglas McGavin urmărind medicul veterinar care asistă această naștere și am făcut o remarcă off-the-cuff lui Douglas. I-am spus, „știi ce vom avea pentru a apela acest miel? Va trebui să o numim Dolly, după Dolly Parton, deoarece celulele sunt derivate din țesutul mamar.Wilmut: fiind oarecum puritanic, s-ar putea să fi fost un pic îngrijorat. Cu retrospectivă, fără îndoială, a fost un nume minunat.,

Bracken: acesta este un zvon. Nu mi s-a spus asta direct. Dar am auzit că au contactat-o pe Dolly Parton și au spus: „avem o oaie clonată care poartă numele tău.Wilmut: nu știu cum a apărut mesajul, dar ni s-a spus că agentul ei a spus: „nu a existat publicitate baaad.”Nu știu dacă e adevărat.în următoarele câteva luni, echipa lui Wilmut a confirmat că Dolly a fost o clonă a liniei de celule mamare și a scris rezultatele. Nașterea ei urma să fie ținută strict secretă, până când lucrarea Nature care descrie experimentul ar putea fi publicată în februarie 1997 (I., Wilmut și colab. Natura 385, 810-813; 1997).Harry Griffin, director științific, Roslin: cu două sau trei luni înainte de publicarea lucrării, am aflat despre asta. În ceea ce privește pregătirea, au fost implicați PPL. Ei au văzut-o ca pe o oportunitate de a obține publicitate pentru ei înșiși. Am lucrat cu compania lor de PR, de Facto. Am făcut destul de un pic de pregătire.,Wilmut: Ron James, care a fost directorul executiv al ppl therapeutics, și am fost citat ca purtător de cuvânt principal și mi s-a oferit un pic de pregătire de către ex-BBC, care în primul rând au venit și au blocat destul de agresiv microfoanele în nas și au pus întrebări agresive, iar ulterior au făcut-o foarte ușor. Nu am fost abordați nicăieri în apropierea modului agresiv pe care l-au încercat mai întâi, ceea ce a fost destul de șocant. Sunt sigur că a meritat.

Griffin: aveam totul organizat., Apelurile vor fi direcționate către De Facto și vor încerca să organizeze o anumită coerență în răspunsul nostru în ceea ce privește cine a primit prioritate și cine nu. toate acestea vor culmina, am sperat, joi că hârtia a ieșit. Ce a fost asta, 27 februarie? În mod clar, nu a făcut-o.

Wilmut: Robin McKie de la observator a scurs-o. El va nega acuzația.Robin McKie, editor de știință și tehnologie, The Observer, Londra: nu am văzut așa ceva în natură. Nu-l învinovățesc că este supărat, dar m-am dus la mari dureri pentru a evita lucrurile care mă vor face să fiu acuzat de asta., Am ajutat câțiva tipi care făceau un program TV despre genetică, și au spus, ” Oh, apropo, au clonat o oaie în Edinburgh.”Nu I-am crezut, dar am sunat câțiva oameni de pe teren, iar unul dintre ei din America a confirmat. Dar am fost foarte, foarte îngrijorat. Am spus ceva destul de senzațional, cu absolut nici o dovadă de hârtie de ceva care a mers mai departe. I-am spus editorului meu adjunct tot ce știam, iar el m-a pus să scriu. Apoi rahatul a lovit ventilatorul.,Griffin: Ian mi-a dat un telefon și mi-a spus că tocmai a fost chemat și i-a spus că The Observer va difuza povestea în Duminica anterioară publicării în Nature.Ian și cu mine am intrat în institut în jurul orei 9 A.M. duminică, neștiind dacă oamenii pot sau nu să treacă. Telefonul a sunat continuu. Am avut o circumstanță bizară în care un telefon a început să sune într-un dulap de curățare. Când am răspuns, a fost, cred, Daily Mirror, care a avut cumva această legătură specială. Pe la nouă și jumătate noaptea, ne-am dus acasă.,Jim McWhir, om de știință cu celule stem, Roslin: îmi amintesc că am venit în ziua după ce embargoul a izbucnit și erau mai multe autoutilitare prin satelit în parc.Wilmut: erau camioane de televiziune peste tot. M-am dus și am vorbit la Good Morning America.Griffin: CBS, NBC, ABC, BBC, toate acolo doresc interviuri cu Ian, care doresc să vadă oile. A fost haos. Nu cred că puteți aprecia vreodată intensitatea mass-media în zbor complet dacă nu ați experimentat-o singur.

Jeff J., Mitchell / Reuters

un reportaj de duminică despre Dolly a atras atenția mass-media intensă în Scoția.

McWhir: a fost doar pandemoniu. Mergând în jos la unitatea de mare-animal, a fost doar o pădure de becuri flash și reporteri. A fost uimitor. M-am întors și m-am întors la muncă.Griffin: secretara mea punea telefonul jos și suna imediat. Unul dintre numele pe care le-am auzit fiind menționat a fost Harold Shapiro . Ea a spus, „Ian Wilmut nu poate vorbi cu tine acum, poți suna mai târziu?,”Bill Clinton i-a cerut să raporteze în termen de 90 de zile cu privire la implicațiile etice ale clonării. I-am auzit numele și i-am spus: „nu, cu siguranță vrem să vorbim cu el.Colman: când sunteți încorporat într-un proiect, aveți ceea ce considerați a fi motive științifice bune pentru a face acest lucru. Tot ce am făcut a fost acoperit de un comitet de etică. Am trecut prin multe îngrijorări cu privire la sănătatea animalelor. Preocuparea noastră a fost mai mult despre acest tip de reacție. Nu am făcut-o ca un preludiu al clonării oamenilor.Griffin: oamenii din mass-media au apăsat acest punct în mod repetat., Am fost acuzați că am ținut secret nașterea lui Dolly pentru că ne gândeam să clonăm un om. Am avut poziția noastră clară în această privință: era lipsit de etică și nesigur.

Wilmut: merge cu treaba. Trebuie doar să explici că nu este cazul.

Schnieke: în Europa, a fost imediat văzută ca negativă. „Ce au făcut acum și ce ar putea face în continuare?”Am avut poliție la institut care a explicat ce faci dacă există o sperietură cu bombă. Pachetele au fost verificate pentru explozibili.,Walker: îmi amintesc că Jackie, Asistentul Personal al lui Ian Wilmut, a primit telefoane după ce totul a ajuns în presă. Ea a avut o mulțime de apeluri telefonice, unele dintre ele au fost un pic crackpot, de la oameni care doresc câinii lor clonat. Cei mai triști au fost acei oameni care au pierdut copii sau care au avut ei înșiși boli, iar acest lucru va fi un progres care ar putea vindeca diferite boli.Colman: Dolly părea să capteze imaginația. Era un animal cu blană. A avea un nume care a fost identificabil a ajutat enorm.,Bracken: dacă ar fi fost văzută ca un animal care a fost închis, pe care nu mulți oameni l-au văzut, ar fi putut perpetua mai multă publicitate proastă. Dar cred că, din cauza deschiderii, că oamenilor li s-a permis să meargă să o viziteze și să i se arate în jur, acest lucru a ajutat la acceptarea publicului.Griffin: s-a descurcat bine cu aparatul foto și toată lumea a putut vedea că era un animal perfect normal. Pentru că era accesibilă și fotogenică, a devenit cea mai faimoasă oaie din lume. Orice director de marketing ar fi ucis pentru asta., În unele dintre imagini este ca și cum ar intervieva mass-media.Walker: am dus un fotograf să o vadă pe Dolly. Tipul ăsta a produs coroana petrecerii unui copil, o chestie de aur. Am spus: „nu cred că ar trebui.”Cu toții am fost foarte dornici să nu permitem lui Dolly să devină umanizată. Era o oaie și asta a fost.Bracken: departe de mass-media și de camerele de luat vederi, am încercat să o tratăm ca pe celelalte oi, nu ca pe un fel de celebritate, care, evident, a devenit.,Walker: prima dată când a fost tunsă, au luat lâna — pe care am o parte, de fapt — pentru a fi tricotată într-un jumper pentru o caritate de fibroză chistică. Ai văzut-o la muzeu? Acum e în spatele unei cutii de sticlă pentru că oamenii tot ciupeau bucăți de lână de la ea. Cel puțin mi-am luat lâna în timp ce ea era încă în viață.Dolly a trăit șase ani și jumătate și a dat naștere mai multor miei. Dar în 2003, a început să arate semne de boală.Bracken: a fost Ziua Îndrăgostiților. Cred că era vineri. Știam că există potențialul ca această boală pulmonară să se fi dezvoltat.,Griffin: suferea de o boală numită jaagsiekte. Este o boală a plămânilor și una sau două alte oi au trecut în prealabil cu ea.Wilmut: au crezut că ar trebui să fie radiografiată la școala veterinară. Au fost surprinși de mărimea tumorii din plămânii ei. Am dezbătut, în aceste condiții, cât de greu ar trebui să ne luptăm pentru recuperarea ei. N-ar fi mai drăguț să o lăsăm să plece? Așa că am eutanasiat-o. Sunteți responsabil pentru bunăstarea animalelor pe proiectul dumneavoastră.,

Institutul Roslin/Univ. Edinburgh

Bill Ritchie la Institutul Roslin.un deceniu mai târziu, o altă pierdere a lovit echipa științifică cu moartea lui Keith Campbell.

Colman: Keith a fost forța motrice. El a fost persoana care a făcut lucrarea experimentală importantă care a semănat semințele protocolului pe care l-am folosit cu toții. Dolly nu s-ar fi întâmplat fără Keith.

Ritchie: Keith a fost, presupun, „neobișnuit” este probabil lucrul pe care l-ai spune despre el. Era destul de hippy., A condus un gândac Volkswagen, a fumat roll-up-uri, a avut părul lung.Colman: nu a avut o relație grozavă cu Ian. Erau personalități foarte diferite și adesea argumentate.

Wilmut: nu-mi amintesc rânduri. Am fi avut uneori priorități ușor diferite.este întotdeauna foarte dificil să împărțiți recunoașterea. Ceea ce a fost, evident, cauza unor supărări și a unor critici este că nu a primit primul autor pe hârtia Dolly. El a primit absolut toate celelalte. A fost o vreme când a spus că hârtia Megan și Morag era de fapt mai importantă decât Dolly., Cu siguranță a fost frustrat că am primit un FRS (membru al Societății Regale) și, în cele din urmă, un cavaler.după o dispută internă, Campbell s-a sinucis pe 5 octombrie 2012.

Colman: Keith era un prieten foarte bun de-al meu și mergeam cu bicicleta în Scoția seara, după serviciu. Am vorbit cu el cu trei zile înainte să moară. Am fost foarte șocat.Walker: asta m-a lovit foarte tare, mai tare decât mi-aș fi imaginat. Nu l-am mai văzut de mulți ani. Eram un grup atât de strâns pe atunci. Trebuia să fim.,Colman: m-am dus la o întâlnire la Paris în ianuarie anul trecut, unde au avut un premiu postum. Ei au luat un sondaj de paie de cât de mulți oameni din public au fost ajutați de ceea ce a făcut Keith, și un număr foarte mare de oameni au pus mâinile în sus.tehnicile dezvoltate în crearea Dolly au fost folosite pentru a copia animale valoroase și pentru a face animale transgenice. Dar în laboratoarele biomedicale, Dolly a sugerat un viitor în care celulele ar putea fi reprogramate într-o stare asemănătoare embrionului și utilizate pentru tratarea bolilor umane.,Wilmut: nașterea lui Dolly a transformat regulile de dezvoltare cu susul în jos și a făcut o mulțime de biologi să gândească diferit.Jeanne Loring, biolog de celule stem, Institutul de Cercetare Scripps, La Jolla, California: acesta a fost debutul clonării bovinelor, care este de fapt destul de popular acum. Există o valoare extraordinară în a putea îmbunătăți vitele, iar acest lucru le-a oferit oamenilor un alt instrument.George Seidel, biolog de reproducere animală, Universitatea de Stat din Colorado, Fort Collins: există tauri clonați care produc material seminal care este vândut., Există un taur Angus numit Răspuns Final, el a primit o jumătate de milion de urmași sau ceva de genul asta. Deci, clona lui se numește răspunsul Final II, și puteți cumpăra sperma lui la jumătate din preț. Eu și soția mea avem o fermă de vite, așa că folosim răspunsul Final II. Dar din punct de vedere teoretic, lucrurile transgenice sunt mult mai importante decât a face copii. Pentru a face prima noastră vacă transgenică, am creat mii de embrioni. A fost un efort imens. O zecime din bani, o zecime din animale este ceea ce transgenics plus clonarea ar putea face pentru tine.,Robert Lanza, chief scientific officer, Astellas Institute for Regenerative Medicine, Marlborough, Massachusetts: am fost încântat. Acum am putea să sperăm că aplicăm aceeași tehnică — nu atât pentru animale — cât și pentru agricultură-ci pentru tratarea unei liste lungi de boli umane. Ceea ce a arătat Dolly a fost puterea enormă a acestei tehnologii și magia oului. Au existat factori în ou care ar putea duce celulele adulte înapoi în timp și le-ar putea readuce la o stare embrionară.

Shinya Yamanaka, cercetător în celule stem, Universitatea Kyoto, Japonia: răspunsul meu inițial a fost ” Wow!, E ca science fiction.”Dar nu era ceva la care intenționam să lucrez. Judecând după hârtie, procesul de clonare este foarte dificil din punct de vedere tehnic. În anul următor, a apărut prima hârtie cu celule stem embrionare umane. Atunci am reevaluat-o pe Dolly. M-am gândit, cel puțin teoretic, că ar trebui să putem reprograma celulele somatice înapoi în starea embrionară astfel încât să putem face celule stem asemănătoare ES direct din piele sau celule sanguine.McWhir: un rezultat ca Dolly oprește oamenii în urmele lor și ei spun: „ei bine, stai. Dacă aș fi spus că este imposibil, ce altceva spun că este imposibil?,”

Schnieke: aveți câteva experimente în care vă aduce bătăile inimii. Dolly a fost unul.Ritchie: e ca și cum ai avea copii. Nu am nici eu. Poate că Dolly e genul ăla de copil.Wilmut: ar fi greșit să spun numele meu este cunoscut tot drumul în jurul lumii — dar Dolly este.


Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *