¿qué es la secuenciación de ADN de próxima generación?
a diferencia de los métodos de microarray, los enfoques basados en secuencias determinan directamente la secuencia de ácido nucleico de una molécula de ADN o ADNc dada.
la primera incursión importante en la secuenciación del ADN fue el Proyecto Genoma Humano. This project, which used first-generation sequencing, known as Sanger sequencing (the chain-termination method), took 13 years, cost 3 3 billion and was completed in 2003.,
en comparación con la secuenciación de Sanger convencional utilizando electroforesis capilar, la técnica de secuenciación paralela masiva de lectura corta es un enfoque fundamentalmente diferente que revolucionó las capacidades de secuenciación y lanzó los métodos de secuenciación de segunda generación, o secuenciación de próxima generación (NGS), que proporcionan órdenes de magnitud más datos a un costo recurrente mucho menor.
la secuenciación de próxima generación (NGS), también conocida como secuenciación de alto rendimiento, es el término general utilizado para describir una serie de diferentes tecnologías de secuenciación modernas., Estas tecnologías permiten la secuenciación del ADN y el ARN mucho más rápida y barata que la secuenciación de Sanger utilizada anteriormente, y como tal revolucionaron el estudio de la genómica y la biología molecular. Tales tecnologías incluyen:
ventajas de NGS
NGS se puede utilizar para analizar muestras de ADN y ARN y es una herramienta popular en la genómica funcional.,>mayor rango dinámico de señal
NGS technologies
- secuenciación Illumina (Solexa): la secuenciación Illumina funciona identificando simultáneamente bases de ADN, ya que cada base emite una señal fluorescente única, y agregándolas a una cadena de ácido nucleico
- El método se basa en la pirosecuenciación, una técnica que detecta la liberación de pirofosfato, nuevamente usando fluorescencia, después de que los nucleótidos son incorporados por la polimerasa a una nueva hebra de ADN.,
- Ion Torrent: secuenciación de protones / PGM: la secuenciación de Ion Torrent mide la liberación directa de H + (protones) a partir de la incorporación de bases individuales por la ADN polimerasa y, por lo tanto, difiere de los dos métodos anteriores, ya que no mide la luz.
las siguientes páginas proporcionan explicaciones paso a paso de cómo funcionan cada una de estas tecnologías NGS.,
estos videos de Youtube ofrecen una visión general útil de cómo funciona la secuenciación Sanger y las diferentes tecnologías de secuenciación de próxima generación y cuándo usarlas:
secuenciación de próxima generación (NGS) – Una Introducción
¿cuándo uso la secuenciación Sanger vs. NGS? – Seq it Out # 7