Mannitolzout-Agar voor de isolatie van Staphylococcus aureus

Mannitolzout-Agar (MSA) wordt gebruikt als een selectief en differentieel medium voor de isolatie en identificatie van Staphylococcus aureus uit klinische en niet-klinische monsters. Het stimuleert de groei van een groep van bepaalde bacteriën terwijl het remmen van de groei van anderen. Het is een selectief medium bereid volgens de aanbevelingen van Chapman voor de isolatie van vermoedelijk pathogene stafylokokken.,

Composition of Mannitol Salt Agar (MSA)

Ingredients	Gms / Litre
Pancreatic Digest of Casein	5.0 gm
Peptic Digest of Animal Tissue	5.0 gm
Beef Extract	1.,0 gm
Sodium Chloride	75.0 gm
D-Mannitol	10.0 gm
Phenol Red	0.025 gm
Agar	15.0 gm
Total	111. 025 gm

Distilled Water = 1000 ml

Final pH 7.4 ± 0.,2 bij 25°C.

principe van Mannitolzout Agar

Mannitolzout agar bevat peptonen en runderextract, die stikstof, vitaminen, mineralen en aminozuren leveren die essentieel zijn voor de groei. De concentratie van 7,5% natriumchloride resulteert in de gedeeltelijke of volledige remming van andere bacteriële organismen dan stafylokokken. Natriumchloride levert ook essentiële elektrolyten voor transport en osmotische balans. Mannitol is het vergistbare koolhydraat, waarvan de fermentatie leidt tot zuurproductie, gedetecteerd door fenolrood indicator, helpt bij de differentiatie van Staphylococcus soorten., Coagulase-positieve stafylokokken (bijvoorbeeld Staphylococcus aureus) produceren gele kolonies en een omliggend geel medium, terwijl coagulase-negatieve stafylokokken rode kolonies produceren en geen kleurverandering van de fenolrode indicator. Agar is het stollende middel.

toevoeging van 5% v/v Eidooieremulsie maakt het mogelijk de lipase-activiteit van stafylokokken samen met mannitolfermentatie op te sporen. Het zout verwijdert de eidooieremulsie en de lipaseproductie wordt gedetecteerd als gele ondoorzichtige zone rond de kolonies.,

gebruik van Mannitolzout Agar

1. Het wordt gebruikt voor de selectieve isolatie en differentiatie van Staphylococcus aureus uit klinische monsters.
2. Het wordt ook gebruikt voor de telling van stafylokokken in levensmiddelen en zuivelproducten.
3. dit medium is ook opgenomen in het bacteriologische analytische Handboek voor het testen van cosmetica.
4. Het wordt ook gebruikt bij het bacteriologische onderzoek van zwembadwater, spa ‘ s en drinkwater met behulp van membraanfiltratie

bereiding van Mannitolzout Agar

1. Suspend 111.,025 g MRS media in 1000 ml gedestilleerd water.
2. kook om het medium volledig op te lossen.
3. autoclaaf bij 121°C gedurende 15-20 minuten.

(facultatief: voeg 5% v/v Eidooieremulsie toe)

1. afkoelen tot 45-50°C en gieten in petrischalen.,

Result Interpretation on Mannitol Salt Agar

Organisms	Results
Staphylococcus aureus	Yellow colonies with yellow zones.
Staphylococci other than S. aureus (e.g. Staphylococcus epidermidis )	Colorless or Red colonies with red zones.,
Streptococci	No growth to trace growth.
Micrococci	Large white to orange.
Gram-negative bacteria	No growth to trace growth.,

kwaliteitscontrole op Mannitolzout Agar

positieve controle: Staphylococcus aureus ATCC 6538, middelgrote gele kolonies

negatieve controle: Escherichia coli ATCC 25922, gedeeltelijke tot volledige remming.

beperkingen van Mannitolzout Agar

1. verschillende andere Staphylococcus-soorten dan aureus zijn mannitolpositief en produceren gele kolonies omgeven door gele zones op dit medium (bv. S. capitis, S. xylosus, S. cohnii, S. sciuri, S. simulans en andere soorten)., Daarom zijn verdere biochemische tests nodig voor de identificatie van S. aureus of andere soorten.
2. de meeste andere organismen dan stafylokokken worden geremd door de hoge zoutconcentratie die wordt aangetroffen in Mannitolzout-Agar, met uitzondering van enkele halofillische mariene organismen.
3. enkele stammen van Staphylococcus aureus kunnen een vertraagde fermentatie van mannitol vertonen. Negatieve platen moeten ‘ s nachts opnieuw worden geïncubeerd voordat ze worden weggegooid.
4. vermoedelijke Staphylococcus aureus moet worden bevestigd met een coagulasetest.

1. Mannitolzout Agar. HiMedia.,
2. Mannitol Salt Agar (MSA) (Chapman Medium) European Pharmacopoeia, Usp.
3. Mannitol Salt Agar. Accumix.
4. Mannitol Salt Agar. Biokar Diagnostics – Rue des Quarante Mines – ZAC de Ther – Allonne – B.P. 10245 – F60002 Beauvais Cedex – France.
5. Mannitol Salt Agar. Remel.
6. Mannitol Salt Agar. PML Microbiologicals, Inc.
7. Mannitol Salt Agar. Acumedia Manufacturers, Inc.
8. Mannitol Salt Agar. Difco™ & BBL™ Manual, 2nd Edition
9. Mannitol Salt Agar. Liofilchem SRL.
10. BD Mannitol Salt Agar. Becton Dickinson GmbH.,
11. Mannitolzout Agar (MSA). Hardy Diagnostics.
12. Mannitolzout Agar. Gedehydrateerde Kweekmedia. Thermo Fisher Scientific Inc.

---